Сокращения: ИФА ― иммуноферментный анализ, КРС ― крупный рогатый скот ВведениеЖелудочно-кишечные инфекции занимают одно из ведущих мест в патологии молодняка КРС и рассматриваются как серьезная экономическая проблема современного животноводства. По данным литературы, ведущими факторами в этиологии энтеритов являются ротавирус и коронавирус КРС, энтеропатогенные бактерии группы E. coli, роль других инфекционных агентов менее значительна [1, 3, 4].От иммунологического статуса коров-матерей зависит здоровье телят в ранний постнатальный период. Антитела, которые являются в этот период основными факторами защиты от патогенов, они получают с молозивом матери ― единственным источником специфических иммуноглобулинов [2, 7…10]. Для иммунизации стельных коров во многих странах, в том числе и в России, применяют разные модификации вакцин против рота-, коронавируса и эшерихиоза (колибактериоза) с адгезивными антигенами. Однако, эти болезни продолжают лидировать по широте распространения [5, 6, 11]. В связи с этим сотрудниками лабораторий вирусологии и микробиологии ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН (г. Москва) разработана ассоциированная инактивированная вирусно-бактериальная вакцина, в состав которой входят рота- и коронавирус КРС, а также адгезины E. coli (К 99, F 41, Att 25). Цель исследованияИзучить динамику антител в крови и молозиве коров, иммунизированных трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной. Материалы и методыКоров иммунизировали трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной (утв. 27 января 2014 г.) в животноводческом хозяйстве Вологодской области, неблагополучном по желудочно-кишечным инфекциям. Лабораторные исследования осуществляли в отделе по изучению болезней животных инфекционной этиологии Вологодского филиала ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН, в лабораториях вирусологии и микробиологии ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН (г. Москва).Сформировали 2 группы глубокостельных коров: опытную (n=30) и контрольную (n=10). Животным опытной группы вакцину вводили подкожно в среднюю треть шеи в дозе 5,0 мл двукратно с интервалом 20 дней. Коров контрольной группы не иммунизировали. Пробы крови брали до вакцинации (за 40 дней до отела), перед ревакцинацией (за 20 дней до него) и на третий день после рождения телят. Полученный материал исследовали на наличие антител к рота- и коронавирусу методом ИФА, с помощью набора «АНТИТЕЛА-РОДИКОР-ИФА ВИЭВ», антиадгезивные антитела в молозиве выявляли в развернутой реакции агглютинации. Постановку тестов, учет и интерпретацию полученных данных проводили согласно инструкциям каждого из наборов. Работа выполнена в рамках Госзадания № 0578-2014-0024. Результаты и обсуждениеТрехкомпонентная вирусно-бактериальная вакцина при применении стельным коровам индуцировала интенсивный синтез специфических антител в организме иммунизированных животных (табл. 1). Содержание антител к рота- и коронавирусу крупного рогатого скота в сыворотке крови и молозиве коровThe content of antibodies to bovine Rota-and coronavirus in blood serum and colostrum of cowsПериод исследованияТитр антител к ротавирусу (М±m) по группамТитр антител к коронавирусу (М±m) по группамопытная контрольная опытная контрольная За 40 дней до отела (до вакцинации)391,0±103,4380,0±96,2230,0 ± 66,7279,1±170,4За 20 дней до отела (после первой вакцинации)1815,4±144,5***404,3±191,41138,5±72,5***314,0±189,4Через 3 дня после отела2248,2±148,9*411,0±210,71706,7±33,5***314,9±176,5Молозиво первого удоя14040,0±817,2***702,5±243,115200,0±783,9***862,0±695,7Примечание: * Р≥0,95; *** Р≥0,999 ― достоверность разницы средних величин между периодами исследования. Так, титр антител к ротавирусу КРС в сыворотке крови коров опытной группы до начала опыта составлял 391,0±103,4, а через 20 дней после иммунизации трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной он увеличился в 4,6 раза (Р≥0,999). Спустя 23 дня после ревакцинации (на третий день после отела) он стал выше в 1,2 раза (Р≥0,95) по сравнению с предыдущим исследованием. У животных контрольной группы средние показатели титра антител к ротавирусу в эти периоды возрастали незначительно, что говорит о возможном контакте с возбудителем, но были ниже, чем таковые в опытной группе в 4…5 раз.По результатам ИФА титр антител к коронавирусу КРС в сыворотке крови коров опытной группы после иммунизации значительно превышал исходные значения. До вакцинации этот показатель был равен 230,0±66,7; за 20 дней до отела (перед ревакцинацией) увеличился в 4,9 раза (Р≥0,999), а спустя 23 дня после повторной иммунизации возрос в 1,5 раза (Р≥0,999). В контрольной группе коров в эти же сроки средние показатели титра антител оставались на одном уровне ― 314,9±176,5.В молозиве вакцинированных животных концентрация антител к ротавирусу равнялась 14040,0±817,2 (Р≥0,999) и превышала контрольные значения в 20 раз. Средний уровень молозивных антител к коронавирусу у привитых животных был выше в 17,6 раза, чем таковой в контрольной группе, составляя 15200,0±783,9 (Р≥0,999).В молозиве первого удоя коров опытной группы средние значения титра антител к адгезинам E. coli составляли к К 99 ― 6765,7±366,6 (Р≥0,999); к F 41 ― 1868,6±427,6 (Р≥0,999) и к Att 25 ― 1382,8±474,9 (Р≥0,999). В контрольной группе животных они были значительно ниже ― 400,0±295,35; 80,0±28,3 и 27,5±7,5, соответственно.Титр антител к адгезинам E. coli у коров изменялся следующим образом (табл. 2).Уровень специфических антител к адгезинам E. coli в реакции агглютинации 2. The level of specific antibodies to adhesins E. coli agglutination reaction Материал, время взятияТитр антител к адгезинам E. coli, M±m, по группамК 99F 41Att 25опытная контрольная опытная контрольная опытная контрольная Сыворотка крови до вакцинации (за 40 дней до отела)68,5±26,4 60,0±45,0  240,0±180,0 48,6±19,8255,4±91,6 46,6±18,4Сыворотка крови после первой вакцинации (за 20 дней до отела)617,1±369,6 64,3±39,6667,0±307,0 50,6±24,0   937,14±792,0 50,0±17,6 Молозиво первой лактации675,5±154,9*240,0±34,9728,9±148,7**150,0±15,051022,0±120,6***210,0±22,3 Примечание: * ― Р≥0,95; ** ― Р≥0,99; *** ― Р≥0,999 ― достоверность разницы средних между опытной и контрольной группой. Анализ результатов исследования показал, что среднее значение уровня антител к адгезину К 99 в опытной группе коров, привитых вирусно-бактериальной вакциной, за 40 дней до отела (до вакцинации) составил 68,5±26,4, через 20 дней после иммунизации он стал достоверно выше в 9 раз (617,1±369,6). В контрольной группе коров этот показатель изменялся незначительно (64,3±39,6), по сравнению с первоначальным (60,0±45,0).К адгезину F 41 в опытной группе уровень антител до введения вакцины был равен 240,0±180,0, после иммунизации он увеличился в 2,7 раза и составил 667,0±307,0. В контроле средний показатель титра антител к этому адгезину стал равен 50,6±24,0 за 20 дней до отела, по сравнению с первоначальным значением (48,6±19,8) за 40 дней до отела.К адгезину Att 25 в опытной и контрольной группах титр антител до вакцинации был равен 255,4±91,6 и 46,6±18,4, соответственно. Через 20 дней средний показатель стал равен 937,14±792,0 ― в опыте и 50,0±17,6 ― в контроле.Титр секреторных антител к адгезину К 99 в молозиве первого удоя у коров опытной группы составлял 675,5±154,9, к адгезину F 41 ― 728,9±148,7, к адгезину Att 25 ― 1022,0±120,6. Эти показатели были достоверно выше контрольных (Р0≥0,95, Р≥0,99, Р≥0,999). ЗаключениеПроведенные исследования показали, что иммунизация стельных коров трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной способствует выработке антител к компонентам препарата в достаточно высоких титрах, что обеспечит высокий уровень колострального иммунитета у новорожденных телят.