Проведен ретроспективный обзор чувствительности к антимикробным препаратам из группы фторхинолонов и потенцированным сульфаниламидам 120 изолятов наиболее типичных возбудителей бактериальных болезней свиней, выделенных на базе ФГБУ «ВНИИЗЖ» от животных различных возрастных групп в период с 2009 по 2019 годы. Согласно полученным данным, P. multocida, H. parasuis продемонстрировали высокую чувствительность к энрофлоксацину, и его можно использовать для проведения эмпирической терапии пастереллеза и гемофилезного полисерозита. A. pleuropneumoniae и S. suis также продемонстрировали чувствительность к энрофлоксацину, поэтому он может быть рекомендован для лечения актинобациллезной плевропневмонии и стрептококкоза при наличии чувствительности. 50 % изолятов S. suis, выделенных из головного мозга свиней, продемонстрировали чувствительность, поэтому комбинированный препарат на основе триметоприма-сульфамонометоксина (Трисульфон®) можно рекомендовать для лечения стрептококкоза после установления чувствительности.
A retrospective review of antimicrobial susceptibility to the fluoroquinolones and potentiated sulfonamides of 120 isolates of the most typical porcine bacterial pathogens isolated from animals of different age groups from 2009 to 2019 at FGBI «ARRIAH» was carried out. According to the results, P. multocida, H. parasuis are highly susceptible to enrofloxacin, which can be used for empirical treatment of pasteurellosis and Glasser's disease. A. pleuropneumoniae and S. suis are also susceptible to enrofloxacin, so it can be recommended for the treatment of A. pleuropneumonia and streptococcosis. 50% of isolates of S. suis isolated from the brain tissues are susceptible to the potentiated sulfonamides, so this medication can be recommended for the treatment of streptococcosis only after susceptibility testing.
Сокращения: АБП ― антибактериальные препараты, ГЭБ ― гематоэнцефалический барьер, ДВ ― действующее вещество, КОЕ ― колониеобразующие единицы, CLSI ― Clinical and Laboratory Standards Institute (Институт клинических и лабораторных стандартов) ВведениеДинамичное развитие свиноводства в России ставит перед ветеринарной наукой ряд задач, связанных с совершенствованием средств специфической профилактики и лечения инфекционных болезней. Большое значение приобретает этиотропная терапия, и в первую очередь использование АБП, позволяющих значительно снизить ущерб, причиняемый заболеваниями бактериальной этиологии. Цель исследованияРабота представляет собой ретроспективный обзор чувствительности изолятов возбудителей бактериальных болезней свиней, выделенных в Российской Федерации в период с 2014 по 2019 гг. в ФГБУ «ВНИИЗЖ», к следующим АБП:ü энрофлоксацину — ДВ лекарственного препарата для ветеринарного применения под торговой маркой Энроксил®;ü ко-тримоксазолу (потенцированный сульфаниламид) — ДВ лекарственного препарата для ветеринарного применения под торговой маркой Трисульфон®.Данная информация необходима для разработки и применения научно-обоснованных подходов к лечению животных, сдерживанию появления и распространения антибиотикоустойчивых микробов в хозяйствах. Материалы и методыПроведен анализ антибиотикочувствительности 120 изолятов/штаммов возбудителей болезней свиней, из них: Pasteurella multocida ― 30; Haemophillus parasuis ― 30; Actinobacilluspleuropneumoniae ― 30 и Streptococcus suis ― 30.Чувствительность к АБП тестировали диско-диффузионным методом по рекомендациям CLSI [1]. В работе использовали диски АБП: энрофлоксацин ― 5 мкг и ко-тримоксазол ― 25 мкг, производства НИЦФ, Санкт-Петербург.Чувствительность изолятов/штаммов пастерелл и стрептококков к АБП определяли на питательном агаре Мюллера-Хинтон (Himedia); чувствительность изолятов гемофильных бактерий, в том числе возбудителей актинобациллезной плевропневмонии, к АБП ― на питательном агаре Мюллера-Хинтон с добавлением сыворотки крови лошади и V-фактора роста (никотинамид аденин динуклеотид). Бактериальные суспензии изолятов/штаммов готовили на фосфатно-буферном солевом растворе из суточных агаровых культур. Оптическая плотность каждого инокулюма перед использованием составляла 0,5 ед. по шкале МакФарланда, что соответствовало концентрации 1,5×108 КОЕ/см3. Посевы с дисками АБП инкубировали в течение 24 ч при температуре 37 оС. Диаметр зоны ингибирования роста культур измеряли с помощью штангенциркуля и выражали в миллиметрах. Категории чувствительности (чувствительный или резистентный), указанные в таблице 1, определяли путем сравнения зоны задержки роста каждого изолята с рекомендациями CLSI [1].1. Интерпретация чувствительности возбудителей бактериальных заболеваний свиней к энрофлоксацину и ко-тримоксазолу диск-диффузионным методомInterpretation of antimicrobial susceptibility of bacterial pathogens to enrofloxacin and co-trimoxazole by disk diffusion method БактерииДиаметр зоны задержки роста, мм ЭнрофлоксацинКо-тримоксазолчувствительныйрезистентныйчувствительныйрезистентныйA. pleuropneumoniae ≥21 ≤16 ≥16 ≤10Haemophilus parasuisPasteurella multocidaStreptococcus suis Для оценки воспроизводимости и точности процедуры определения чувствительности к АБП параллельно с испытуемыми изолятами в качестве эталонов использовали коллекционные штаммы. Даты исследований и характеристика изолированных от свиней штаммов, а также информация о коллекционных штаммах, представлена в табл. 2…5. 2. Перечень изолятов/штаммов Pasteurella multocida от свинейList of Pasteurella multocida isolates/strains from pigs№ п/пИзолят/штаммСерогруппаДата выделения (получения)Орган выделенияВозраст животного, сутки1Изолят А25.08.2009Легкие1252»А13.09.2010»653»D (DNT+)12.03.2011Носовые ходы754»А12.03.2011Легкие1455»D04.02.2013н/у1006»А05.10.2014Легкие957»А05.02.2015»608»А11.11.2016»709»А02.04.2016»12010»D30.04.2016»65…12011»А05.06.2016»14012»А28.06.2016»12013»А03.03.2017»16214»А08.03.2017»9015»А25.03.2017»23516»А15.04.2017»6017»А28.05.2017»4518»А11.06.2107»60…8019»А24.09.2017»5720»А24.09.2017»16021»А16.09.2017»4622»А21.09.207»135…13823»А23.11.2018»н/у24»А21.11.2018»120…15025»А29.11.2018»н/у26»А11.12.2018»50…5527»А17.12.2018»60…13028Штамм№1231А---29Штамм №9D---30ШтаммKobe-6D---Примечание: н/у ― не указан 3. Перечень изолятов/штаммов Haemophillus parasuis от свинейList of isolates/strains of Haemophilus parasuis from pigs № п/пИзолят/штаммСеротипДата выделения (получения)Орган выделенияВозраст животного, сутки1Изолят н/о13.06.2008Легкие352»н/о18.04.2008»483»512.05.2009»25…354»н/о25.08.2009»58…655»502.04.2010»30…456»409.03.2011»688»н/о12.10.2012»40…609»н/о13.08.2013»5610»н/о15.09.2013»38…4611»502.03.2014»6512»н/о23.10.2014»50…7013»н/о14.04.2015»60…9014»н/о05.06.2015»40…5515»н/о02.10.2015»6516»н/о08.11.2015»48…5217»512.03.2016»4518»н/о25.06.2016»35…4519»н/о03.07.2016»60…7520»н/о11.09.2016»5021»н/о03.02.2017»35…5522»н/о18.04.2017»6523»н/о22.12.2017»30…4524»513.03.2018Головной мозг40…8025»н/о06.06.2018Легкие3526»511.12.2018»50…5527Штамм Nagasaki518.06.2015--28Штамм SW-124418.06.2015--29Штамм №19417420.04.2014--30Штамм «Уральский»5-Легкие45Примечание: н/о ― не определен. 4. Перечень изолятов/штаммов Actinobacillus pleuropneumoniaeList of isolates/strains of Actinobacillus pleuropneumoniae№ п/пИзолят/штаммСеротипДата выделения Орган выделенияВозраст животного, сутки1Изолят925.08.2009Легкие1252»203.10.2009»1053»822.04.2009»804»1018.07.2009»755»1005.10.2009»1206»203.04.2010»857»711.09.2010»1488»812.05.2011»1129»716.04.2013»12510»616.04.2013»70…9011»705.04.2014»10512»604.11.2014»6913»212.02.2015»70…8014»912.03.2016Селезенка3515»511.11.2016Легкие7016»502.04.2016»12017»515.01.2017»14018»210.02.2017»16319»503.03.2017»10020»525.03.2017»80…12021»503.03.2017»92…12722»215.03.2017»90…13023»207.05.2017»10024»н/о24.04.2018»7225»806.06.2018»10526»521.08.2018»11027»н/о21.11.2018»120…15028»1003.12.2018»н/у29»221.02.2019»70…19030Штамм «Ш-1»203.06.2011»11031Штамм №29089218.10.2011-- 5. Происхождение изолятов/штаммов Streptococcus suisOrigin of isolates/strains of Streptococcus suis№ п/пИзолят/штаммДата выделения (получения)Орган выделенияВозраст животного, сутки1Изолят12.06.2013Сустав602»13.08.2013»503»15.03.2014»754»03.11.2014»40…505»10.02.2015Селезенка456»03.04.2015»1507»20.05.2015Сустав508»21.05.2015»1109»27.11.2015Головной мозг5010»27.01.2016Печень, селезенка1…211»15.04.2016Головной мозг6512»28.05.2016Селезенка2013»18.06.2016Головной мозг5514»05.08.2016»30…3515»23.11.2016»6316»18.02.2017Селезенка3517»01.03.2017Головной мозг6018»15.04.2017Селезенка5319»03.05.2017Сустав2120»06.05.2107»2121»08.05.2107Селезенка3522»09.07.2017Печень, селезенка4223»02.08.2017Селезенка524»24.04.2017Сустав5025»27.04.2017Головной мозг50…6026»05.06.2018»10…1527»03.06.2018»34…3828»11.10.2018»30…3529Штамм «КА-2»02.03.2015»55»30Штамм №4376503.08.2016-- Результаты Результаты приведены в таблицах. Все 27 исследуемых изолятов P. multocida проявили чувствительность к энрофлоксацину (рис. 1). Из 28 изолятов A. pleuropneumoniae резистентность к энрофлоксацину выявлена у 5 (17,8 %). Из 26 изолятов H. parasuis резистентность к энрофлоксацину обнаружена у 2 (7,69 %). Рис. 1. Чувствительность изолятов P. multocida, A. pleuropneumoniae и H. parasuis к энрофлоксацинуFig. 1. Susceptibility of P. multocida, A. pleuropneumoniae and H. parasuis isolates to enrofloxacin Из 28 исследуемых изолятов S. suis резистентность к энрофлоксацину проявили 4 (14,28 %) (рис. 2). В тоже время к ко-тримоксазолу резистентность обнаружена у 15 (53,7 %) изолятов. Необходимо отметить, что у 3 (10,71 %) изолятов стрептококка выявлена резистентность сразу к обоим АБП. Рис. 2 Чувствительность изолятов Streptococcus suis к энрофлоксацину и ко-тримоксазолуFig. 2. Susceptibility of Streptococcus suis isolates to enrofloxacin and co-trimoxazoleОдним из частых проявлений стрептококковой инфекции поросят служит менингит, и одной из целей ретроспективного анализа была оценка чувствительности изолятов S. suis к энрофлоксацину и комбинации «триметоприм-сульфамонометоксин». Данные АБП были выбраны исходя из их фармакологических характеристик: бактерицидное действие в отношении широкого спектра микроорганизмов, быстрое всасывание в кровь и проникновение через ГЭБ.В связи с этим отдельно оценивали чувствительность изолятов S. suis, выделенных из головного мозга свиней. Из 10 изолятов S. suis, выделенных из головного мозга свиней, резистентность к энрофлоксацину проявили 2 (20 %), а к ко-тримоксазолу ― 5 (50 %) (рис. 3).Рис. 3 Чувствительность изолятов Streptococcus suis, выделенных из головного мозга свиней к энрофлоксацину и котримоксазолуFig. 3. Susceptibility of Streptococcus suis isolated from swine brain tissues to enrofloxacin and co-trimoxazole Заключение1. Энрофлоксацин (в частности, препараты под торговой маркой Энроксил®) можно рекомендовать для проведения эмпирической антимикробной терапии пастереллеза и гемофилезного полисерозита свиней.2. Эффективное использование энрофлоксацина (в частности, препаратов под торговой маркой Энроксил®) для лечения актинобациллезной плевропневмонии и стрептококкоза свинейвозможно только после установления чувствительности возбудителя к данному препарату.3. Эффективное использование сульфаниламидных препаратов (в частности, препаратов под торговой маркой Трисульфон®) для лечения менингитной, суставной и септической форм стрептококкоза свиней, возбудителем которого является Streptococcus suis, возможно только после установления чувствительности возбудителя к данному препарату. Конфликт интересовКомпания ООО «КРКА ФАРМА» действует в интересах KRKA d. d. ― производителя лекарственных средств под торговой маркой Энроксил® (энрофлоксацин), Трисульфон® (триметоприм/сульфамонометоксин)