Проведен ретроспективный обзор чувствительности к антимикробным препаратам из группы фторхинолонов 134 изолятов наиболее типичных возбудителей бактериальных болезней свиней, 74 изолята возбудителей респираторных болезней крупного рогатого скота (КРС) и 101 изолят возбудителей мастита КРС, выделенных на базе ФГБУ «ВНИИЗЖ» от животных различных возрастных групп в период с 2014 по 2019 год. Возбудители респираторных заболеваний свиней P. multocida, A. pleuropleumoniae, H. parasuis проявили высокую чувствительность к марбофлоксацину, в связи с чем его можно рекомендовать для лечения респираторных инфекций свиней. Возбудители респираторных болезней КРС также проявили высокую чувствительность к марбофлоксацину и его можно рекомендовать для лечения бактериальных инфекций крупного рогатого скота.
A retrospective review of antimicrobial susceptibility testing of 134 bacterial isolates to fluoroquinolones, which are the most common in pigs, 74 isolates of cattle respiratory pathogens, and 101 isolates of causative agents of cattle mastitis isolated at FSBE «ARRIAH». The testing was held on animals from different age groups since 2014 to 2019. The causative agents of respiratory diseases in pigs P. multocida, A. pleuropleumoniae, H. parasuis showed high sensitivity to marbofloxacin, and therefore it can be recommended for the treatment of respiratory infections of pigs. The causative agents of cattle respiratory diseases also demonstrate high susceptibility to marbofloxacin, and can be recommended for the treatment of bacterial infections in cattle.
Сокращения: АБП ― антибактериальные препараты, ДНК ― дезоксирибонуклеиновая кислота, КОЕ ― колониеобразующие единицы, КРС ― крупный рогатый скот, CLSI ― Clinical and Laboratory Standards Institute (Институт клинических и лабораторных стандартов. Ранее ― National Committee for Clinical Laboratory Standards, NCCLS ― Национальный комитет по клиническим и лабораторным стандартам) ВведениеДинамичное развитие животноводства в России ставит перед ветеринарной наукой ряд задач, связанных с совершенствованием средств специфической профилактики и лечения инфекционных болезней свиней и КРС. Большое значение приобретает этиотропная терапия, и в первую очередь использование антибиотиков, позволяющих значительно снизить ущерб, причиняемый заболеваниями бактериальной этиологии.Марбофлоксацин относится к антибактериальным препаратам группы фторхинолонов III поколения, разработанный специально для ветеринарии. Препарат обладает широким спектром бактерицидного действия, основанного на подавлении бактериальных ферментов ДНК-гиразы и топоизомеразы IV, участвующих в репликации ДНК микроорганизмов. Цель исследованияОпределить чувствительность изолятов возбудителей респираторных заболеваний свиней и КРС, а также возбудителей мастита КРС, выделенных в хозяйствах Российской Федерации за период 2014‒2019 гг, к марбофлоксацину. Данная информация необходима для разработки и применения научно-обоснованных подходов к лечению животных, сдерживанию появления и распространения антибиотикоустойчивых возбудителей в хозяйствах. РезультатыПроведен анализ антибиотикочувствительности:ü 134 изолята/штамма возбудителей респираторных болезней свиней. Из них: Pasteurella multocida ― 32; Haemophillus parasuis ― 30; Actinobacillus pleuropneumoniae ― 37 и Streptococcus suis ― 35;ü 74 изолята/штамма возбудителей респираторных болезней КРС. Из них: Pasteurella multocida ― 31; Mannheimia haemolytica ― 35 и Haemophilus (Histophilus) somnus (somni) ― 8.ü 101 изолят возбудителей мастита КРС. Из них: Streptococcus agalactiae ― 48; Streptococcus disgalactiae ― 4, Streptococcus uberis ― 8, Staphylococcus aureus ― 22, Staphylococcus hyicus ― 2, Staphylococcus haemolyticus ― 1, Trueperella (Actinomyces) pyogenes ― 8, Escherichia coli ― 7, Pseudomonas aeruginosa ― 1.Чувствительность к АБП тестировали диско-диффузионным методом по рекомендациям CLSI (США). В работе использовали диски марбофлоксацина (5 мкг) производства компании BDBBLтм, США.Чувствительность изолятов/штаммов возбудителей к антибиотику определяли на питательном агаре Мюллера-Хинтон (Himedia); чувствительность изолятов гемофильных бактерий к АБП ― на питательном агаре Мюллера-Хинтон с добавлением сыворотки крови лошади, V-фактора роста (никотинамидадениндинуклеотид). Бактериальные суспензии изолятов/штаммов готовили на фосфатно-буферном солевом растворе из суточных агаровых культур. Оптическая плотность каждого инокулюма перед использованием составляла 0,5 ед. по шкале МакФарланда, что соответствовало концентрации 1,5×108 КОЕ/см3. Посевы с дисками АБП инкубировали в течение 24 ч при температуре (36,5±0,5)оС. Диаметр зоны ингибирования роста культур измеряли с помощью штангенциркуля и выражали в миллиметрах. Категории чувствительности (чувствительный, промежуточный или резистентный) определяли путем сравнения зоны задержки роста каждого изолята с рекомендациями Национального комитета по Клиническим Лабораторным Стандартам [1]. Диаметр зоны задержки роста чувствительных изолятов составляет ≥20 мм, промежуточных ― 15…19 мм, резистентных ― ≤14 мм.Для оценки воспроизводимости и точности процедуры определения чувствительности к АБП параллельно с испытуемыми изолятами в качестве эталонов использовали коллекционные штаммы. 1. Перечень изолятов/штаммов Pasteurella multocida от свинейList of isolates/strains of Pasteurella multocida from pigs № п/пИзолят/штаммСерогруппаДата выделения (получения)Орган выделенияВозраст, сутки1ИзолятА25.08.2009Легкие1252»А13.09.2010»653»D (DNT+)12.03.2011Носовые смывы754»А12.03.2011Легкие1455»D04.02.2013н/у1006»А05.10.2014Легкие957»А05.02.2015»608»А11.11.2016»709»А02.04.2016»12010»D30.04.2016»65…12011»А05.06.2016»14012»А28.06.2016»12013»А03.03.2017»16214»А08.03.2017»9015»А25.03.2017»23516»А15.04.2017»6017»А28.05.2017»4518»А11.06.2017»60…8019»А24.09.2017»5720»А24.09.2017»16021»А16.09.2017»4622»А21.09.2017»135…13823»А23.11.2018»н/у24»А21.11.2018»120…15025»А29.11.2018»н/у26»А11.12.2018»50…5527»А17.12.2018»60…13029»А19.03.2019»280…87030Штамм №1231А---31Штамм №9D---32Штамм Kobe-6D---Примечание: н/у ― не указан. 2. Перечень изолятов/штаммов Haemophillus parasuis от свинейList of isolates/strains of Haemophilus parasuis from pigs № п/пИзолят/штаммСеротипДата выделения (получения)Орган выделенияВозраст, сутки1Изолятн/о13.06.2008Легкие352»н/о18.04.2008»483»512.05.2009»25…354»н/о25.08.2009»58…655»502.04.2010»30…456»409.03.2011»688»н/о12.10.2012»40…609»н/о13.08.2013»5610»н/о15.09.2013»38…4611»502.03.2014»6512»н/о23.10.2014»50…7013»н/о14.04.2015»60…9014»н/о05.06.2015»40…5515»н/о02.10.2015»6516»н/о08.11.2015»48…5217»512.03.2016»4518»н/о25.06.2016»35…4519»н/о03.07.2016»60…7520»н/о11.09.2016»5021»н/о03.02.2017»35…5522»н/о18.04.2017»6523»н/о22.12.2017»30…4524»513.03.2018Головной мозг40…8025»н/о06.06.2018Легкие3526»511.12.2018»50…5527Штамм Nagasaki518.06.2015--28Штамм SW-124418.06.2015--29Штамм №19417420.04.2014--30Штамм «Уральский»5-Легкие45Примечание: н/о ― не определен. 3. Перечень изолятов/штаммов Actinobacillus pleuropneumoniae от свинейList of isolates/strains of Actinobacillus pleuropneumoniae from pigs №Изолят/штаммСеротипДата выделения (получения) Орган выделенияВозраст, сутки1Изолят925.08.2009Легкие1252»203.10.2009»1053»822.04.2009»804»1018.07.2009»755»1005.10.2009»1206»203.04.2010»857»711.09.2010»1488»812.05.2011»1129»716.04.2013»12510»616.04.2013»70…9011»705.04.2014»10512»604.11.2014»6913»912.03.2016Селезенка3514»511.11.2016Легкие7015»502.04.2016»12016»515.01.2017»14017»210.02.2017»16318»503.03.2017»0019»525.03.2017»80…12020»503.03.2017»92…12721»215.03.2017»90…13022»207.05.2017»10023»н/о24.04.2018»7224»806.06.2018»10525»521.08.2018»11026»н/о21.11.2018»120…15027»1003.12.2018»н/у28»221.02.2019»70…19029»н/о19.03.2019»21…12630»225.03.2019»н/у31»227.03.2019»15232»508.05.2019»30…4533»531.05.2019»93…10934»н/о13.08.2019»н/у35Штамм «Ш-1»203.06.2011»11036Щтамм №29089218.10.2011--37Штамм №33377518.10.2011--Примечание: н/о – не определен, н/у – не указан 4. Перечень изолятов/штаммов Streptococcus suis от свинейList of isolates/strains of Streptococcus suis from pigs№ п/пИзолят/штаммДата выделения (получения)Орган выделенияВозраст, сутки1Изолят12.06.2013Сустав602»13.08.2013»503»15.03.2014»754»03.11.2014»40…505»10.02.2015Селезенка456»03.04.2015»1507»20.05.2015Сустав508»21.05.2015»1109»27.11.2015Головной мозг5010»27.01.2016Печень, селезенка1…211»15.04.2016Головной мозг6512»28.05.2016Селезенка2013»18.06.2016Головной мозг5514»05.08.2016» »30…3515»23.11.2016» »6316»18.02.2017Селезенка3517»01.03.2017Головной мозг6018»15.04.2017Селезенка5319»03.05.2017Сустав2120»06.05.2107»2121»08.05.2107Селезенка3522»09.07.2017Печень, селезенка4223»02.08.2017Селезенка524»24.04.2017Сустав5025»27.04.2017Головной мозг50…6026»05.06.2018» »10…1527»03.06.2018» »34…3828»11.10.2018» »30…3529»14.01.2019» »н/у30»05.04.2019» »н/у31»19.04.2019» »н/у32»24.05.2019» »н/у33»06.08.2019» »25…6034Штамм «КА-2»02.03.2015» »5534Штамм №4376503.08.2016--Примечание: н/у ― не указано Рис. 1. Чувствительность изолятов P. multocida, H. parasuis, A. pleuropneumoniae и S. suis к марбофлоксацинуFig. 1. Susceptibility of P. multocida, H. parasuis, A. pleuropneumoniae and S. suis isolates to marbofloxacin Все 29 исследуемых изолятов P. multocida, 26 изолятов H. parasuis и 34 изолята A. pleuropneumoniae проявили высокую чувствительность к марбофлоксацину. Из 33 исследуемых изолятов S. suis у 7 отмечена слабая чувствительность к препарату. Необходимо отметить, что из 96 протестированных изолятов возбудителей респираторных болезней свиней не выявлено ни одного резистентного. 5 Перечень изолятов Pasteurella multocida от КРСList of isolates Pasteurella multocida from cattle № п/пИзолятДата выделения (получения)Орган выделенияВозраст, сутки1Изолят10.06.2015Легкиен/у2»02.07.2015»»3»05.08.2015»»4»03.09.2015»605»14.09.2015»н/у6»14.10.2015»н/у7»28.10.2015»30…408»24.02.2016»н/у9»17.05.2016»»10»27.06.2016»»11»12.08.2016»»12»16.09.2016»18013»28.10.2016»120…18014»13.02.2017Носовые смывы6…9015»11.05.2017Легкие13…4516»20.06.2017»н/у17»06.07.2017»»18»10.01.2018Носовые смывы30…12019»12.02.2018Легкиен/у20»15.02.2018»3021»15.02.2018Носовые смывы15022»17.08.2018Легкиен/у23»30.08.2018»60…9024»25.09.2018Носовые смывы, легкие90…12025»24.10.2018Носовые смывы, легкиен/у26»26.10.2018Легкие»27»09.01.2019»»28»09.01.2019»70…8029»18.07.2019»н/у30»18.07.2019»»31»16.08.2019»»Примечание: н/у – не указан. 5. Перечень изолятов/штаммов Mannheimia haemolytica от КРСList of isolates/strains Mannheimia haemolytica from cattlle № п/пИзолят/штаммДата выделения (получения)Орган выделенияВозраст, сутки1Изолят10.11.2014Легкие15…302»19.11.2014Носовые смывын/у3»26.12.2014Легкиен/у4»27.03.2015»»5»02.06.2015»»6»15.06.2015»»7»02.07.2015»»8»30.07.2015»»9»03.09.2015»6010»15.09.2015»9011»14.09.2015»н/у12»09.02.2016»6013»29.03.2016»16…72014»17.05.2016»н/у15»27.06.2016»»16»16.09.2016»18017»29.09.2016»7518»17.01.2017»73019»13.02.2017Носовые смывы6…9019»21.03.2017Легкое9020»28.03.2017»365…73021»06.07.2017»н/у22»18.10.2017»н/у23»10.01.2018Носовые смывы30…12024»15.02.2018Легкие3025»15.02.2018Носовые смывы15026»03.05.2018Легкиен/у27»10.08.2018»н/у28»30.08.2018»60…9029»22.11.2018Носовые смывын/у30»09.01.2019Легкие»31»09.01.2019»»32»18.01.2019»30…4533»18.03.2019»н/у34»18.07.2019»»35Штамм №2969610.11.2017--Примечание: н/у – не указан. 7. Перечень изолятов Histophilus somni от КРС № п/пДата выделения (получения)Орган выделенияВозраст, сутки110.11.2014Легкие15…30217.02.2015»н/у328.04.2015»90422.06.2015»60515.09.2015»90616.05.2016Суставы конечностей30703.11.2016Легкоен/у813.01.2018Легкое, смывы из носа» »Примечание: н/у – не указан 8. Перечень изолятов ― возбудителей мастита КРСList of isolates - of the causative agents of mastitis in cattle№ п/пДатаВозбудитель124.09.2015Streptococcus agalactiaeTrueperella (Actinomyces) pyogenes224.06.2015Streptococcus agalactiaeTrueperella (Actinomyces) pyogenes308.07.2015Streptococcus agalactiae430.07.2015Staphylococcus aureus521.08.2015Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus615.09.2015Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus723.10.2015Streptococcus agalactiaeEscherichia coli824.12.2015Streptococcus agalactiaeStreptococcus uberisEscherichia coli926.01.2016Streptococcus agalactiae1003.02.2016Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus1119.02.2016Streptococcus agalactiae1209.03.2016Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus1306.04.2016Staphylococcus aureusTrueperella (Actinomyces) pyogenes1419.08.2016Streptococcus agalactiae1522.08.2016Streptococcus uberis1610.10.2016Streptococcus agalactiae1720.10.2016»1803.11.2016Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus1901.11.2016Trueperella (Actinomyces) pyogenes2003.03.2017Streptococcus agalactiae2114.03.2017»2227.03.2017»2330.03.2017Staphylococcus aureus2411.05.2017Streptococcus agalactiaeTrueperella (Actinomyces) pyogenes2531.05.2017Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus2626.07.2017Streptococcus agalactiaePseudomonas aeruginosa2701.08.2017Staphylococcus aureus2820.09.2017Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus2921.09.2017Streptococcus agalactiae3021.09.2017Streptococcus agalactiaeEscherichia coli3114.12.2017Streptococcus agalactiae3217.01.2018»3318.01.2018Streptococcus agalactiaeTrueperella (Actinomyces) pyogenesEscherichia coli3423.01.2018Streptococcus agalactiaeStaphylococcus hyicus3526.01.2018Staphylococcus hyicus3615.02.2018Streptococcus uberis3719.02.2018Streptococcus agalactiaeTrueperella (Actinomyces) pyogenes3811.04.2018Streptococcus agalactiae3907.05.2018Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus4031.05.2018Escherichia coli4127.06.2018Streptococcus agalactiae4208.08.2018»4309.08.2018Streptococcus uberis4431.08.2018Streptococcus disgalactiae4531.07.2018»4606.11.2018Streptococcus agalactiae4715.11.2018»4822.11.2018»4918.12.2018Streptococcus agalactiaeEscherichia coli5014.01.2019Streptococcus agalactiae5114.01.2019Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus5231.01.2019Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus5319.02.2019Trueperella (Actinomyces) pyogenes5426.02.2019Streptococcus agalactiae5527.02.2019»5628.02.2019Streptococcus agalactiaeStreptococcus uberisStaphylococcus haemolyticus5718.03.2019Streptococcus disgalactiae5803.04.2019Staphylococcus aureusEscherichia coli5916.04.2019Streptococcus disgalactiae6026.04.2019Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus6115.05.2019Streptococcus uberisStaphylococcus aureus6212.07.2019Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus6323.07.2019Streptococcus uberis6414.08.2019Staphylococcus aureus6528.08.2019Streptococcus agalactiaeStaphylococcus aureus6628.08.2019Streptococcus agalactiaeStreptococcus uberisStaphylococcus aureus6729.08.2019Staphylococcus aureus6805.09.2019Streptococcus agalactiae Рис. 2. Чувствительность изолятов Streptococcus agalactiae и Staphylococcus aureus к марбофлоксацинуFig. 2. Susceptibility of Streptococcus agalactiae and Staphylococcus aureus isolates to marbofloxacin Из 48 исследуемых изолятов Streptococcus agalactiae промежуточную чувствительность к марбофлоксацину проявили 6 (12,5 %), а резистентность ― 2 (4,1 %). Остальные 40 изолятов (83,4 %) показали высокую чувствительность к препарату. Из 22 изолятов Staphylococcus aureus промежуточную чувствительность к антибиотику проявили 4 (18,8 %), при этом резистентных не обнаружено.Все 4 исследуемых изолята Streptococcus disgalactiae, 8 изолятов Streptococcus uberis, 8 изолятов Trueperella (Actinomyces) pyogenes, 2 изолята Staphylococcus hyicus, 1 изолят Staphylococcus haemolyticus и 1 изолят Pseudomonas aeruginosa проявили высокую чувствительность к марбофлоксацину. Из 7 исследуемых изолятов Escherichia coli ― два проявили промежуточную чувствительность и один проявил резистентность. Выводы1. Марбофлоксацин (в частности, препарат под торговой маркой Марфлоксин®) высокоэффективен в отношении возбудителей респираторных заболеваний свиней (Pasteurella multocida, Haemophilus parasuis, Actinobacillus pleuropneumoniae и Streptococcus suis).2. Марбофлоксацин (в частности, препарат под торговой маркой Марфлоксин®) высокоэффективен в отношении возбудителей респираторных заболеваний КРС (Pasteurella multocida, Mannheimia haemolytica и Histophilus somni).3. Марбофлоксацин (в частности, препарат под торговой маркой Марфлоксин®) эффективен в отношении возбудителей мастита КРС (Streptococcus agalactiae, Streptococcus disgalactiae, Streptococcus uberis, Staphylococcus aureus, Trueperella (Actinomyces) pyogenes, Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa). Конфликт интересовКомпания ООО «КРКА ФАРМА» действует в интересах KRKA d. d. ― производителя лекарственного средства под торговой маркой Марфлоксин® (марбофлоксацин).