Работа выполнена при поддержке Фонда содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере. Сокращения: АлАТ ― аланинаминотрансфераза, АсАТ ― аспартатаминотрансфераза, БАК ― биохимический анализ крови, в/в ― внутривенно, в/м ― внутримышечно, ГТФ ― гуанозинтрифосфат, ДНК ― дезоксирибонуклеиновая кислота, ИФН ― интерферон, ЛДГ ― лактатдегидрогеназа, ЛП ― лекарственный препарат, ЛФ ― лейкоформула, МЕ ― международные единицы, МТ ― масса тела, нм ― нанометры, ОАК ― общий анализ крови, ПЦР ― полимеразно-цепная реакция, РНК ― рибонуклеиновая кислота, СОЭ ― скорость оседания эритроцитов, ЩФ ― щелочная фосфатаза. ВведениеПарвовирусы принадлежат к семейству Parvoviridae, подсемейству Parvovirinae, роду Parvovirus. Размеры вириона составляют 20…25 нм. Нуклеотид содержит одноцепочечную линейную, плюс-нитевую молекулу ДНК [1, 2].Парвовирус собак довольно устойчив во внешней среде, чем объясняется его широкая распространенность. Выдерживает нагревание до 60 оС в течение 1 ч, рН 3,9…9,0. Устойчив к диэтиловому эфиру, хлороформу и пищеварительным ферментам [3]. Инактивируется гипохлоритом натрия, формалином и некоторыми другими детергентами.Источником инфекции являются больные животные и реконвалесценты. Возможные пути передачи вируса ― через кровососущих насекомых и трансплацентарное заражение [4, 5]. Наиболее восприимчивы к вирусу щенки в возрасте до 12 месяцев [6]. Характерный гематологический диагностический признак ― панлейкопения [12, 13].Интерферон ингибирует репликацию широкого спектра различных ДНК- и РНК-вирусов животных как в культуре клеток, так и в организме животных [7…9]. В системах клеточных культур основным этапом ингибируемого цикла репликации вирусов является синтез вирусных белков [9, 10]. Среди ИФН-индуцированных белков, участвующих в противовирусном действии ИФН в инфицированных вирусом клетках, отмечены протеинкиназа-R, 2',5'-олигоаденилатсинтетаза (OAS) и РНКаза-L, РНК-специфическая аденозиндеаминаза (ADAR) и Mx белковые ГТФазы. Двухцепочечная РНК играет центральную роль в модулировании фосфорилирования белка, деградации РНК и редактировании РНК, катализируемом индуцируемыми ИФН ферментами: киназой PKR, OAS и дезаминазой ADAR1 [11, 12]. Цель исследованияИзучить эффективность экспериментального ветеринарного ЛП (производитель ООО «Научно-Технологический Центр «БиоИнвест», Москва) как средства профилактики развития симптомов вторичных инфекций и осложнений у щенков, больных парвовирозом. Экспериментальный ЛП в качестве действующего вещества содержит интерферон собаки альфа-1 активностью 1 000 000 МЕ/мл. Материалы и методыРандомизированное, контролируемое, проспективное исследование эффективности и безопасности раствора для инъекций ИФН альфа собаки при парвовирозе собак проведено в «Центре ветеринарной помощи» г. Дзержинска, являющегося филиалом кафедры «Анатомия, хирургия и внутренние незаразные болезни» ФГБОУ ВО «Нижегородская сельскохозяйственная академия».В исследование включили 20 щенков собак разного пола и различных пород, в возрасте 2…4 месяца, средней МТ 7,5 кг, не вакцинированных, принадлежащих питомникам и охранной организации.Критерии включения в эксперимент ― диагноз «парвовироз», установленный по совокупности клинических и лабораторных признаков; возраст пациента ― до 6 месяцев.Критерии исключения из эксперимента ― тяжелые аллергические заболевания, патологии печени и почек, травмы.Все животные соответствовали критериям включения и исключения.Рандомизация выполнена однократным, бесповторным способом. Диагноз устанавливали комплексным методом, с учетом анамнеза, клинических проявлений и результатов лабораторных исследований (ПЦР, ОАК, БАК).В процессе исследования контролировали следующие параметры: динамику симптомов, скорость выздоровления, смертность; показатели ОАК (с СОЭ и ЛФ), БАК (билирубин общий, прямой, АсАТ, АлАТ, ЩФ, ЛДГ, мочевина, креатинин, глюкоза, альфа-амилаза, общий белок, глобулины, холестерол); симптомы вторичных инфекций и осложнений в динамике.Клиническое состояние животных и динамику симптомов, в том числе вторичных инфекций и осложнений (кроме ринита и конъюнктивита), оценивали по балльной системе, где сильная степень выраженности симптома соответствовала 3 баллам, умеренная ― 2, слабая степень ― 1 баллу, отсутствие симптома ― 0 баллов. Набор характеристик для каждого оцениваемого симптома взят из работы Foster&Smith «Determination of hydration status in dogs and cats» [14]. Система балльной оценки симптомокомплекса основного заболевания, то есть парвовирусной инфекции (выраженности конъюнктивита и ринита) представлена в таблице 1.  1.      Система балльной оценки выраженности конъюнктивита и ринитаThe system for assessing the severity of conjunctivitis and rhinitis in points Степень выраженности конъюнктивита (ринита), баллысерозногогнойногоконъюнктивит  (ринит) отсутствуетСлабаяУмереннаяСильнаяСлабаяУмереннаяСильная1234560 Статистическую обработку результатов проводили с помощью непараметрических методов. Статистическую значимость различий определяли на уровне р≤0,05. Данные по безопасности оценивали по частоте выявления негативных эффектов.Обследование пациентов включало в себя следующие этапы:1.                  сбор анамнеза;2.                  клинический осмотр, термометрия, аускультация сердца и легких, подсчет пульса и частоты дыханий в минуту, определение МТ;3.                  ПЦР на парвовирус, аденовирус (I, II), чуму плотоядных, коронавирус собак;4.                  ОАК и БАК.Массу тела пациентов определяли на ветеринарных весах ТВ-М-300.2-А3.Кровь у собак брали на первичном приеме из подкожной ветки v. cephalica, согласно методике, описанной Э. Рудлофф et al. [15]. Пробы крови помещали в термоконтейнер с хладагентом и доставляли в лабораторию с соблюдением температурного режима 2…8 оС. Лабораторные исследования (ОАК, БАК, ПЦР) проводили в ветеринарной лаборатории «Веттест» (г. Нижний Новгород, ул. Должанская 37а). Анализ лабораторных проб выполняли не позднее 24 ч с момента взятия крови у собаки. Для ОАК использовали анализатор «HemaScreenVet» с определением СОЭ и микроскопией мазка по стандартным методикам; для БАК ― анализатор «Super Z». ПЦР проводили на аппарате марки DTlite с использованием реактивов производства ООО «Интерлабсервис», согласно инструкциям.Пациентов исследовали в 1-й и 9-й день эксперимента.Животные обеих групп получали одинаковое лечение, которое включало в себя следующие средства:Гентамицин в/вМетронидазол в/вЭтамзилат в/м 2 р/д,Церукал в/м 2 р/д,Гембаланс в/м 1 раз/деньАминокапроновая кислота в/в, 2 раза/деньИнфузионная терапия раствором ХартманаРеамберин в/вДимедрол в/мДюфалайт в/вЛауритин-С в/мЖивотные опытной группы дополнительно получали ИФН альфа собаки в/м в среднесуточной дозе 1 000 000 МЕ, 1,0 мл/10 кг МТ, 1 раз в день, 7…10 дней.Выбор способа введения, интервала применения препарата обусловлен данными о его составе и фармакокинетике ИФН альфа собаки в организме собак [16, 17]. Результаты и обсуждениеРезультаты первичного обследования животных. Инфекционный синдром включал в себя вялость, апатию, нарушение аппетита и приема воды, рвоту, диарею, кахексию, болезненность брюшной стенки и отмечался у 100 % животных. Вторичные инфекции и осложнения в 1-йдень исследования были представлены конъюнктивитом, ринитом, одышкой (табл. 2). 2.      Распределение вторичных инфекций и осложнений у животных в 1-й день наблюденияDistribution of secondary infections and complications in animals on day 1 of observationСимптомЧисло животных с симптомами в группеопытнойконтрольнойКонъюнктивит32Ринит10Одышка22Судорожные явления00Дегидратация мякишей лап00р (показатель анализа сопряженности)1,0Результаты оценки эффективности ИФН альфа собаки. За время клинического наблюдения за экспериментальными животными зарегистрированы следующие симптомы вторичных инфекций и осложнений: конъюнктивит, ринит, одышка, судорожные явления, дегидратация мякишей лап.Выраженность конъюнктивита и ринита оценивали по балльной системе.В таблице 1 представлены данные балльной оценки симптомов вторичных инфекций и осложнений в опытной группе.В опытной группе из вторичных инфекций и осложнений не отмечены судороги и дегидратация мякишей лап. Динамика проявления симптомов снижалась по мере выздоровления животных от основного заболевания. Симптомы вторичных инфекций полностью исчезли на 6-е сутки эксперимента.В таблице 3 приведены данные балльной оценки симптомов вторичных инфекций и осложнений в опытной и контрольной группах. 3.      Усредненные данные балльной оценки симптомов вторичных инфекций и осложнений в опытной (О) и контрольной (К) группе.The severity of symptoms of secondary infections and complications in the control group in points СуткиКонъюнктивитРинитОдышкаСудорожные явленияДегидратация мякишей лапСумма балловОКОКОКОКОКОК11,331,001,0003,002,0000005,333,0021,331,401,0002,252,6000004,584,0031,331,601,501,332,751,7500005,584,6842,003,401,252,502,672,0000005,927,9051,672,001,332,000,502,000002,003,508,00615,0002,0002,000001,001,0010,00704,0002,0001,500001,0008,50804,0005,0001,5001,0001,00012,50904,0005,0002,0001,0001,00013,00 В контрольной группе с увеличением сроков клинического наблюдения нарастает динамика вторичных инфекций и осложнений. В отличие от опытной группы, в контроле начиная с 5-х суток отмечается дегидратация мякишей лап, а с 7-х суток ― судорожные явления. Продолжительность симптомов вторичных инфекций и осложнений выходит за рамки клинического наблюдения (9 суток) и продолжается до 12 суток.В таблице 4 и на рисунке представлены сравнительные данные динамики симптомов вторичных инфекций и осложнений больных парвовирозом собак по суткам.4.      Сравнительные данные динамики симптомов вторичных инфекций и осложнений у собак обеих групп, баллыComparison of symptoms of secondary infections and complications between groups  Группа наблюденияВыраженность симптомов, баллы, по суткам 123456789Опыт5,334,585,585,923,501,000,000,000,00Контроль3,004,004,687,908,0010,008,5012,5013,00р (показатель достоверности)0,003  Рис. Сравнительные данные динамики симптомов вторичных инфекций и осложнений у собак обеих группComparison of symptoms of secondary infections and complications between groups ВыводыПрименение ИФН альфа собаки в/м сокращает сроки купирования симптомов вторичных инфекций и предотвращает развитие осложнений у больных парвовирозом собак (р = 0,003).Применение ИФН альфа собаки в/м не вызывает побочных явлений и осложнений. Конфликт интересовПроизводителем препарата и спонсором данного исследования является ООО «Научно-Технологический Центр «БиоИнвест». Решение о публикации результатов научной работы принадлежит коллективу кафедры «Анатомия, хирургия и внутренние незаразные болезни» Нижегородской ГСХА и разработчику препарата «Научно-Технологический Центр «БиоИнвест».