сотрудник
Вологда, Вологодская область, Россия
сотрудник
Вологда, Вологодская область, Россия
сотрудник
Вологда, Вологодская область, Россия
сотрудник
Вологда, Вологодская область, Россия
сотрудник
Москва, г. Москва и Московская область, Россия
сотрудник
Москва, г. Москва и Московская область, Россия
сотрудник
Москва, г. Москва и Московская область, Россия
сотрудник
Москва, г. Москва и Московская область, Россия
сотрудник
Москва, г. Москва и Московская область, Россия
В статье представлены результаты изучения иммунного статуса коров, привитых трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной. Установлено, что препарат индуцирует у глубокостельных животных высокий титр антител к рота- и коронавирусу крупного рогатого скота, а также к адгезинам E. coli: К 99, F 41, Att 2. Цель исследования. Изучить динамику образования антител в крови и молозиве коров, иммунизированных трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной. Материалы и методы. Исследования проводили на базе двух хозяйств Вологодской области, неблагополучных по вирусно-бактериальным инфекциям. Материалом для лабораторного исследования служили сыворотки крови новорожденных животных, полученных от коров-матерей, иммунизированных вирусно-бактериальной вакциной (опытные группы), а также ― от телят, рожденных от невакцинированных коров (контрольные группы). Глубокостельным коровам опытных групп вводили трехкомпонентную вирусно-бактериальную вакцину в среднюю треть шеи подкожно в дозе 5 мл двукратно с интервалом 20 дней. В сыворотке крови телят титр антител к рота-, коронавирусу устанавливали с применением набора «АНТИТЕЛА-РОДИКОР-ИФА ВИЭВ». Антиадгезивные антитела выявляли в развернутой реакции агглютинации. Результаты. Иммунный ответ на введение вакцины производства ФГБНУ ВИЭВ выявлен у всех животных, тогда как в сыворотке крови коров контрольных групп он оказался значительно ниже. В молозиве первого удоя титры антител к рота- и коронавирусу были достоверно выше, по сравнению с контрольными. Все показатели свидетельствуют о достаточной антигенной активности испытуемой вакцины. Заключение. Проведенные исследования показали, что иммунизация стельных коров трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной способствует выработке антител к компонентам препарата в достаточно высоких титрах, что обеспечит высокий уровень колострального иммунитета у новорожденных телят.
вакцинация, стельные коровы, молозиво, титры антител, иммунитет.
Сокращения: ИФА ― иммуноферментный анализ, КРС ― крупный рогатый скот
Введение
Желудочно-кишечные инфекции занимают одно из ведущих мест в патологии молодняка КРС и рассматриваются как серьезная экономическая проблема современного животноводства. По данным литературы, ведущими факторами в этиологии энтеритов являются ротавирус и коронавирус КРС, энтеропатогенные бактерии группы E. coli, роль других инфекционных агентов менее значительна [1, 3, 4].
От иммунологического статуса коров-матерей зависит здоровье телят в ранний постнатальный период. Антитела, которые являются в этот период основными факторами защиты от патогенов, они получают с молозивом матери ― единственным источником специфических иммуноглобулинов [2, 7…10]. Для иммунизации стельных коров во многих странах, в том числе и в России, применяют разные модификации вакцин против рота-, коронавируса и эшерихиоза (колибактериоза) с адгезивными антигенами. Однако, эти болезни продолжают лидировать по широте распространения [5, 6, 11]. В связи с этим сотрудниками лабораторий вирусологии и микробиологии ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН (г. Москва) разработана ассоциированная инактивированная вирусно-бактериальная вакцина, в состав которой входят рота- и коронавирус КРС, а также адгезины E. coli (К 99, F 41, Att 25).
Цель исследования
Изучить динамику антител в крови и молозиве коров, иммунизированных трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной.
Материалы и методы
Коров иммунизировали трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной (утв. 27 января 2014 г.) в животноводческом хозяйстве Вологодской области, неблагополучном по желудочно-кишечным инфекциям. Лабораторные исследования осуществляли в отделе по изучению болезней животных инфекционной этиологии Вологодского филиала ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН, в лабораториях вирусологии и микробиологии ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН (г. Москва).
Сформировали 2 группы глубокостельных коров: опытную (n=30) и контрольную (n=10). Животным опытной группы вакцину вводили подкожно в среднюю треть шеи в дозе 5,0 мл двукратно с интервалом 20 дней. Коров контрольной группы не иммунизировали. Пробы крови брали до вакцинации (за 40 дней до отела), перед ревакцинацией (за 20 дней до него) и на третий день после рождения телят. Полученный материал исследовали на наличие антител к рота- и коронавирусу методом ИФА, с помощью набора «АНТИТЕЛА-РОДИКОР-ИФА ВИЭВ», антиадгезивные антитела в молозиве выявляли в развернутой реакции агглютинации. Постановку тестов, учет и интерпретацию полученных данных проводили согласно инструкциям каждого из наборов. Работа выполнена в рамках Госзадания № 0578-2014-0024.
Результаты и обсуждение
Трехкомпонентная вирусно-бактериальная вакцина при применении стельным коровам индуцировала интенсивный синтез специфических антител в организме иммунизированных животных (табл. 1).
- Содержание антител к рота- и коронавирусу крупного рогатого скота в сыворотке крови и молозиве коров
The content of antibodies to bovine Rota-and coronavirus in blood serum and colostrum of cows
|
Период исследования |
Титр антител к ротавирусу (М±m) по группам |
Титр антител к коронавирусу (М±m) по группам |
||
|
опытная |
контрольная |
опытная |
контрольная |
|
|
За 40 дней до отела (до вакцинации) |
391,0±103,4 |
380,0±96,2 |
230,0 ± 66,7 |
279,1±170,4 |
|
За 20 дней до отела (после первой вакцинации) |
1815,4±144,5*** |
404,3±191,4 |
1138,5±72,5*** |
314,0±189,4 |
|
Через 3 дня после отела |
2248,2±148,9* |
411,0±210,7 |
1706,7±33,5*** |
314,9±176,5 |
|
Молозиво первого удоя |
14040,0±817,2*** |
702,5±243,1 |
15200,0±783,9*** |
862,0±695,7 |
Примечание: * Р≥0,95; *** Р≥0,999 ― достоверность разницы средних величин между периодами исследования.
Так, титр антител к ротавирусу КРС в сыворотке крови коров опытной группы до начала опыта составлял 391,0±103,4, а через 20 дней после иммунизации трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной он увеличился в 4,6 раза (Р≥0,999). Спустя 23 дня после ревакцинации (на третий день после отела) он стал выше в 1,2 раза (Р≥0,95) по сравнению с предыдущим исследованием. У животных контрольной группы средние показатели титра антител к ротавирусу в эти периоды возрастали незначительно, что говорит о возможном контакте с возбудителем, но были ниже, чем таковые в опытной группе в 4…5 раз.
По результатам ИФА титр антител к коронавирусу КРС в сыворотке крови коров опытной группы после иммунизации значительно превышал исходные значения. До вакцинации этот показатель был равен 230,0±66,7; за 20 дней до отела (перед ревакцинацией) увеличился в 4,9 раза (Р≥0,999), а спустя 23 дня после повторной иммунизации возрос в 1,5 раза (Р≥0,999). В контрольной группе коров в эти же сроки средние показатели титра антител оставались на одном уровне ― 314,9±176,5.
В молозиве вакцинированных животных концентрация антител к ротавирусу равнялась 14040,0±817,2 (Р≥0,999) и превышала контрольные значения в 20 раз. Средний уровень молозивных антител к коронавирусу у привитых животных был выше в 17,6 раза, чем таковой в контрольной группе, составляя 15200,0±783,9 (Р≥0,999).
В молозиве первого удоя коров опытной группы средние значения титра антител к адгезинам E. coli составляли к К 99 ― 6765,7±366,6 (Р≥0,999); к F 41 ― 1868,6±427,6 (Р≥0,999) и к Att 25 ― 1382,8±474,9 (Р≥0,999). В контрольной группе животных они были значительно ниже ― 400,0±295,35; 80,0±28,3 и 27,5±7,5, соответственно.
Титр антител к адгезинам E. coli у коров изменялся следующим образом (табл. 2).
- Уровень специфических антител к адгезинам E. coli в реакции агглютинации
2. The level of specific antibodies to adhesins E. coli agglutination reaction
|
Материал, время взятия |
Титр антител к адгезинам E. coli, M±m, по группам |
|||||
|
К 99 |
F 41 |
Att 25 |
||||
|
опытная
|
контрольная
|
опытная
|
контрольная
|
опытная
|
контрольная
|
|
|
Сыворотка крови до вакцинации (за 40 дней до отела) |
68,5±26,4
|
60,0±45,0
|
240,0±180,0
|
48,6±19,8 |
255,4±91,6
|
46,6±18,4 |
|
Сыворотка крови после первой вакцинации (за 20 дней до отела) |
617,1±369,6
|
64,3±39,6 |
667,0±307,0
|
50,6±24,0
|
937,14±792,0
|
50,0±17,6
|
|
Молозиво первой лактации |
675,5±154,9* |
240,0±34,9 |
728,9±148,7** |
150,0±15,05 |
1022,0±120,6*** |
210,0±22,3
|
Примечание: * ― Р≥0,95; ** ― Р≥0,99; *** ― Р≥0,999 ― достоверность разницы средних между опытной и контрольной группой.
Анализ результатов исследования показал, что среднее значение уровня антител к адгезину К 99 в опытной группе коров, привитых вирусно-бактериальной вакциной, за 40 дней до отела (до вакцинации) составил 68,5±26,4, через 20 дней после иммунизации он стал достоверно выше в 9 раз (617,1±369,6). В контрольной группе коров этот показатель изменялся незначительно (64,3±39,6), по сравнению с первоначальным (60,0±45,0).
К адгезину F 41 в опытной группе уровень антител до введения вакцины был равен 240,0±180,0, после иммунизации он увеличился в 2,7 раза и составил 667,0±307,0. В контроле средний показатель титра антител к этому адгезину стал равен 50,6±24,0 за 20 дней до отела, по сравнению с первоначальным значением (48,6±19,8) за 40 дней до отела.
К адгезину Att 25 в опытной и контрольной группах титр антител до вакцинации был равен 255,4±91,6 и 46,6±18,4, соответственно. Через 20 дней средний показатель стал равен 937,14±792,0 ― в опыте и 50,0±17,6 ― в контроле.
Титр секреторных антител к адгезину К 99 в молозиве первого удоя у коров опытной группы составлял 675,5±154,9, к адгезину F 41 ― 728,9±148,7, к адгезину Att 25 ― 1022,0±120,6. Эти показатели были достоверно выше контрольных (Р0≥0,95, Р≥0,99, Р≥0,999).
Заключение
Проведенные исследования показали, что иммунизация стельных коров трехкомпонентной вирусно-бактериальной вакциной способствует выработке антител к компонентам препарата в достаточно высоких титрах, что обеспечит высокий уровень колострального иммунитета у новорожденных телят.
1. Воеводина, Ю.А. Результаты применения гаммаглобулиновых фракций гипериммунной сыворотки к адгезинам E. coli. / Ю.А. Воеводина, В.Н. Макарова, А.В. Горбатов и др. // Труды ВИЭВ. - 2013. - № 77. - С. 52-54.
2. Писаренко Н.А. Молозиво, его состав, свойства и значение для новорожденных телят: методическое пособие / Н.А. Писаренко. - Ставрополь: Издательство Ставропольского научно-исследовательского института животноводства и кормопроизводства, 2004. - 19 с.
3. Макарова, В.Н. Видовой спектр микробных ассоциаций, выделенных от телят с желудочно-кишечными заболеваниями / В.Н. Макарова, И.Н. Симанова, О.Б. Бадеева // Российский ветеринарный журнал. - 2015. - № 4. - С. 34-35.
4. Юров, К.П. Современный подход к диагностике респираторных инфекций крупного рогатого скота, вызываемых корона- и герпесвирусами / К.П. Юров, С.В. Алексеенкова, А.В. Пчельников и др. // Ветеринария. - 2013. - № 9. - С. 23-29.
5. Яромчик, Я.П. Иммуногенность ассоциированной инактивированной вакцины против ротавирусной инфекции и колибактериоза крупного рогатого скота / Я.П. Яромчик // Ученые записки УО ВГАВМ. - 2012. - № 48. - С. 59-62.
6. Badiei, K. Fecal rotavirus antigen in diarrheic calves of high and average producing Holstein dairy cows / K. Badiei, M. Pourjafar, M. Ghane // Global Veterinaria. - 2010. - No. 5. - pp. 175-179.
7. Brennet, J. Passive Lactogenic Immunity in Calves. / J. Brennet // Israel J. Vet. Med. - 1991. - No. 46. - pp. 1-12.
8. Donovan, D.C. Effect of maternal cell transferred with colostrum on cellular responses to pathogen antigens in neonatal calves / D.C. Donovan, A.J. Reber, J.D. Gabbard et al. // Amer. J. Vet. Res. - 2007. -No. 68. - pp. 778-782.
9. Etzei, L.R. Development of automated turbidimetric immunoassay for quantification of bovine serum immunoglobulin / L.R. Etzei, R.E. Strohberhn, J.K. McVicer // Amer. J. Vet. Res. - 1997. - No. 58. - pp. 1201-1205.
10. Gooden, S.M. Colostrum management for dairy calves / S.M. Gooden // Vet. Clinics Food Anim. - 2008. - Mar. 24 (1) - pp. 19-39.
11. Johnson, J.L. Effects of feeding heat-treated colostrums on passive transfer of immune and nutritional parameters in neonatal dairy calves / J.L. Johnson, S.M. Godden, T. Molitor et al. // J. Dairy Sci. - 2007. - No. 11 - pp. 589-591.
