Научно-практическая ассоциация ветеринарных нефрологов и урологов (Президент ассоциации)
Россия
Россия
Москва, г. Москва и Московская область, Россия
Москва, г. Москва и Московская область, Россия
Москва, г. Москва и Московская область, Россия
ГРНТИ 68.41 Ветеринария
Ренальная анемия ― одно из частых осложнений хронической болезни почек (ХБП) у кошек, значимо снижающее качество жизни животных. Чаще всего механизм развития ренальной анемии связан с недостаточностью эндогенного эритропоэтина (ЭПО) или с сокращением срока жизни эритроцитов, вызванным уремической интоксикацией. Поскольку анемия приводит к усугублению тяжести ренальной гипертензии и других симптомов ХБП, особую актуальность приобретает поиск эффективных лекарственных средств, способных стимулировать эритропоэз при ХБП и при этом не обладающих нефротоксическими свойствами. Цель работы состояла в изучении эффективности подключения к схеме лечения кошек с ХБП Гамавита ― комплексного препарата, действующими веществами которого являются иммуностимулятор ― нуклеинат натрия и экстракт плаценты денатурированной. В исследование были включены 20 кошек разных пород в возрасте от 5 до 16 лет с ХБП III…IV стадии по классификации IRIS, сопровождающейся анемией и снижением показателя гематокрита от 25 и до 16 %. Пациентов распределили на 2 равных группы ― контрольную (n=10) и опытную (n=10) в случайном порядке с помощью метода блочной рандомизации. В контрольной группе использовали стандартную нефропротективную схему терапии. В опытной группе дополнительно применяли «Гамавит®, раствор для инъекций 10 мл». Гамавит вводили в дозе 0,5 мл/кг 1 раз в сутки, в одно и то же время. Общий курс составил 14 дней (7 дней в/в и 7 дней п/к). Условия кормления и содержания животных опытной и контрольной групп были идентичными. Для кормления использовали стандартизированный серийный корм ― Purina CatChow Adult с курицей/индейкой/лососем. Доступ к питьевой воде ― ad libitum. По окончании исследования оценка терапевтической эффективности проводилась комплексно с учетом данных клинического осмотра, результатов общего и биохимического анализов крови. Дополнительно оценивали наличие побочных эффектов. Исходная численность эритроцитов, а также показатель гематокрита и уровень гемоглобина в опытной и контрольной группах были на нижней границе нормы либо ниже референсных значений. В ходе эксперимента у животных опытной группы уже через 2 недели данные показатели пришли в норму, тогда как в контрольной группе существенных изменений не было. Статистически значимая разница между опытной и контрольной группами сохранялась до конца наблюдения (р=0,001). Уровни креатинина и мочевины в сыворотке крови животных обеих групп были и оставались стабильно высокими, однако в опытной группе в ходе эксперимента удалось добиться существенного снижения данных показателей. Исходный уровень ЭПО в обеих группах был существенно ниже, чем у здоровых животных. В ходе эксперимента достигнуть нижней границы нормального значения не удалось, что позволяет сделать вывод о том, что стимуляция показателей эритропоэза в опытной группе, наблюдаемая под действием Гамавита, не связана со стимуляцией выработки эндогенного ЭПО. Таким образом, в ходе исследования выявлено, что Гамавит стимулирует эритропоэз у кошек с ХБП III…IV стадией, а именно, достоверно повышает количество эритроцитов, уровень гематокрита и гемоглобина, проявляя этот эффект в совокупности со снижением показателей уремической интоксикации (уровней креатинина и мочевины), приводит к улучшению общего состояния пациентов и регрессу ряда важных клинических проявлений. Поскольку в процессе данного исследования у Гамавита не было выявлено каких-либо нефротоксичных свойств и нежелательных взаимодействий с препаратами стандартной нефропротективной терапии, то он может быть рекомендован к широкому использованию у кошек в качестве одного из патогенетических, симптоматических и лечебно-профилактических средств в комплексной терапии ХБП на доклинических и клинических этапах заболевания.
хроническая болезнь почек, анемия, эритропоэз, гематокрит, гамавит, креатинин, кошки
Сокращения: АПФ ― ангиотензинпревращающий фермент, в/в ― внутривенно, Д0 ― день 0, КИ ― клиническое исследование, п/к ― подкожно, РААС ― ренин-ангиотензин-альдостероновая система, УЗИ ― ультразвуковое исследование, ХБП ― хроническая болезнь почек, ЭПО ― эритропоэтин, Hb ― haemoglobin (гемоглобин), IRIS ― International Renal Interest Society (Международное общество изучения заболеваний почек)
Введение
Ренальная анемия ― одно из многочисленных осложнений ХБП у кошек, значимо снижающее качество жизни животных [14]. Анемию выявляют примерно у 30…65 % кошек с ХБП [30].
Чаще всего механизмы развития и стойкости ренальной анемии связывают с недостаточностью эндогенного ЭПО (снижением его выработки почками или уменьшением активности его рецепторных взаимодействий) либо с сокращением срока жизни эритроцитов, во многом обусловленном уремической интоксикацией [14, 33, 35].
Анемия неизбежно приводит к развитию гипоксии тканей и органов, а также к снижению общей и специфической резистентности организма, при этом особенно серьезно страдают от гипоксии почки, так как процессы реабсорбции в их канальцевом аппарате требуют больших затрат кислорода и энергии. Таким образом, анемия усугубляет тяжесть ренальной гипертензии и других симптомов ХБП. Это обусловливает актуальность поиска эффективных лекарственных средств, способных влиять на качественные и количественные показатели эритропоэза и при этом не обладающих нефротоксическими свойствами [13, 31].
Коммерческие препараты на основе ЭПО, видоспецифических для собак и кошек, до сих пор не разработаны, а рекомбинантные ЭПО, помимо высокой стоимости, обладают значительной реактогенностью [14, 32, 34, 39]. Побочные эффекты включают в себя рвоту, гипертензию, судорожные припадки и лихорадку [30].
Цель исследования
Изучить эффективность включения в схему лечения кошек с ХБП Гамавита ― комплексного отечественного препарата, действующими веществами которого являются иммуностимулятор ― нуклеинат натрия и экстракт плаценты денатурированной. Гамавит применяют в ветеринарии для повышения резистентности организма [1, 7, 8, 24, 28], коррекции анемии [1, 22, 23, 26, 27], восстановления биохимических параметров крови при паразитарных инвазиях [1, 8, 12, 17, 26], детоксикации [9, 10, 15, 16, 18, 19, 21, 25] и иных целей [5, 6, 9, 20].
Материалы и методы
Исследование проводили в период с 14.01.2020 по 25.02.2020 на базе стационара ветеринарной клиники «Доберман» (г. Челябинск).
Животные и критерии их включения в эксперимент. Целевые животные ― коты и кошки разных пород с ХБП III…IV стадии по классификации IRIS, сопровождающейся анемией и снижением показателя гематокрита от 25 и до 16%.
Критерии включения животных в исследование:
ü ХБП* III…IV стадии по классификации IRIS;
ü снижение показателя гематокрита от 25 и до 16 %;
ü стабильное состояние (на фоне стандартной нефропротективной терапии) в течение не менее 1 недели;
ü возраст от 5 до 16 лет включительно.
*Диагноз ХБП ставили на основании результатов неинвазивных методов диагностики: биохимического анализа крови, общеклинического анализа мочи и УЗИ.
Были сформированы две группы целевых животных: опытная (n=10) и контрольная (n=10). Животных по группам распределяли в случайном порядке; для обеспечения равномерного распределения использован метод блочной рандомизации. Распределяли по группам сразу после включения животных в исследование.
Особые условия. Условия кормления и содержания животных опытной и контрольной групп были идентичными. Для кормления использовали стандартизированный серийный корм ― Purina CatChow Adult с курицей/индейкой/лососем. Доступ к питьевой воде ― ad libitum.
Схемы лечения. Схема лечения (стандартная нефропротективная терапия) в контрольной группе приведена в таблице 1.
1. Схема лечения в контрольной группе (стандартный протокол)
1. Treatment regimen in the control group (standard protocol)
Препарат |
Цель использования |
Доза |
Нефропротекция |
||
Телмисартан (Микардис, Семинтра) |
Блокатор рецепторов ангиотензина. Контроль гиперактивности РААС, вазодилятация первичной микро капиллярной сети почек, ангиопротекция, нефропротекция |
Внутрь 1 мг/кг 1 раз в сутки, 42 дня |
Сулодексид+дерматан сульфат (ВесселДуэФ, Ангиофлюкс) |
Ангиопротекция, улучшение реологических свойств крови, нефропротекция |
Раствор 300 ЛЕ/мл: 0,3 мл п/к или в/в 1 раз в сутки, 42 дня |
Торасемид (Диувер, Тригрим) |
Профилактика застойных явлений в организме (гидроторакс, гидроперикард), контроль гиперактивности РААС (свойства и АПФ), умеренное форсирование диуреза |
Внутрь 0,625 мг/кг 1 раз в 48 ч, 42 дня |
Севеламер (Ренагель, Селамирекс) |
Блокада всасывания фосфора в кишечнике. Контроль Са/Р обмена, компенсированной и декомпенсированой гиперфосфатемии, косвенно ― гиперпаратиреоза |
Табл. 800 мг: по ¼ табл. внутрь 3 раза в сутки, 42 дня |
Парикальцитол (Земплар) |
Блокатор кальциевых рецепторов паращитовидной железы. Контроль гиперфункции паращитовидной железы, нивелирование действия паратгормона (ведущий «уремический» токсин) на свои рецепторы 1 типа (костная ткань) и 2 типа (большинство иных тканей организма) |
1 мкг/животное внутрь 1 раз в 72 ч, 42 дня |
Прочие препараты |
||
Дисоль или 4% раствор или гидрокарбонат натрия |
Профилактика/терапия метаболического ацидоза и гиповолемии |
15…25 мл/кг в/в симптоматически 1…2 раза в сутки |
Нефротект + Липофундин 10% |
Раствор аминокислот и жиров для парентерального питания |
10…15/15…20 мл/кг симптоматически при анорексии |
Пантопрозол (Нольпаза) |
Профилактика/лечение уремического гастрита |
Симптоматически 20 мг/животное внутрь или в/в 1 раз в сутки |
Метоклопрамид (Церукал) |
Противорвотный и прокинетический препарат |
Симптоматически в/в, п/к 0,625 мг/кг или 1 мг/кг внутрь 2…3 раза в сутки симптоматически |
Прамипексол (Мирапекс 0,25 мг) |
Дофаминомиметик (агонист дофаминовых рецепторов). (Дефицит дофамина является одной из ведущих причин развития хронического дистресса и экзогенной депрессии у кошек.) |
0,03…0,05 мг/кг 1…4 раза в сутки симптоматически для стресснеустойчивых животных |
Схема лечения в опытной группе заключалась в следующем. Эффективность препарата «Гамавит®, раствор для инъекций 10 мл» оценивали в сравнении со стандартной схемой нефропротективной терапии. Препарат вводили в дозе 0,5 мл/кг 1 раз в сутки, в одно и то же время, дополнительно к стандартному протоколу. Общий курс составил 14 дней (7 дней в/в и 7 дней п/к).
Оценка общего клинического состояния животных. Оценивали следующие показатели: общее состояние, активность, аппетит, гидратация кожного покрова, качество шерстного покрова, наличие уремического поражения кожи, изменения глазного дна.
Пробы крови для общеклинического анализа брали перед началом лечения (на момент включения в КИ (Д0), затем на 14-й (Д14), 28-й (Д28) и 42-й (Д42) день после начала лечения согласно плану КИ.
Исследование выполнено в лаборатории ветеринарной клиники «Доберман», г. Челябинск, с использованием гематологического анализатора WML-420B (Wondcon Pets Division, Китай, 2018 года выпуска).
Пробы крови для биохимического анализа брали перед началом лечения (на момент включения в КИ (Д0), затем на 42-й (Д42) день после начала лечения согласно плану КИ.
Взятие и отправка проб крови проведены согласно стандартным правилам. Биохимическое исследование выполнено в лаборатории ветеринарной клиники «Доберман», г. Челябинск, с использованием биохимического анализатора BioChemSA (HTI,США, 2013).
Ультрасонографическое исследование проводили, чтобы исключить макроструктурные изменения почек и мочевого пузыря, однократно до начала лечения, с использованием аппарата УЗИ Diagnostic ultra sound systems 2200V, HDI-Lim, США, 2013 года выпуска
Оценка терапевтической эффективности. По окончании исследования оценивали терапевтическую эффективность комплексным методом: с учетом данных клинического осмотра, результатов общего и биохимического анализов крови. Дополнительно оценивали наличие побочных эффектов.
Оценка общего клинического состояния: отсутствие новых осложнений ХБП (появление дегидратации, изменение качества шерсти, анорексия, астения, парез задних конечностей, гидроторакс, гидроперикард, значительное ухудшение состояния глазного дна, кровоизлияния в переднюю камеру глаза, галитоз), отсутствие усугубления уже имеющихся признаков.
Изменения в анализах крови: стабилизация/редукция уровня азотемии; нормализация показателей красной крови относительно исходных значений.
Статистический анализ данных проведен с использованием программы IBM SPSS statistic 26 общепринятыми методами. Для анализа показателей использован многомерный дисперсный анализ ANOVA (линейная модель с повторными измерениями). При межгрупповом сравнении использован критерий Манна-Уитни. Результаты в таблицах представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего (M ± m). Различия между группами считаются статистически значимыми, если значение р не превысит 0,05, а наблюденная мощность будет не ниже 80 %.
Результаты и обсуждение
Для проведения исследования предварительно было отобрано 20 кошек с диагнозом ХБП III…IV стадии по классификации IRIS с анемией. Диагноз был поставлен комплексно на основании анамнеза, данных клинического осмотра с учетом результатов неинвазивных методов исследования. Исключенных из исследования кошек не было. На момент включения в исследование все животные получали стандартную нефропротективную терапию в течение не менее 1 недели.
Общее состояние пациентов на протяжении всего периода наблюдений было стабильным. Значимого ухудшения во время лечения не отмечено ни у одного из них. При первичном осмотре у части животных отмечали ухудшение качества кожи и шерсти, признаки уремического дерматита (в том и другом случае, являющиеся, предположительно, следствием гиперпаратиреоза) и поражения глазного дна (следствие системной гипертензии).
В ходе исследования у пациентов опытной группы вышеописанные клинические проявления становились менее выраженными или, по крайней мере, не ухудшались.
При ультрасонографии почек в опытной и контрольной группах были выявлены структурные изменения почек от средней до тяжелой степени (УЗИ признаки нефросклероза 3…4-й степени). Значимых изменений после исследования в обеих группах зафиксировано не было.
Результаты исследования показателей крови животных опытной и контрольной групп приведены в таблицах 2…6.
2. Содержание эритроцитов, •1012 /л, в крови у животных опытной и контрольной групп
2. Levels of red blood cells, •1012 /l, in the blood of experimental and control animals
Срок исследования |
Норма |
Опытная группа (n=10) |
Контрольная группа (n=10) |
Значимость, р ANOVA/ Манна-Уитни |
Д0 (1) |
5,60…10,00 |
5,680±0,512 |
5,220±1,059 |
0,001/0,075 |
2 недели (Д14) |
7,140±1,495 |
5,230±1,277 |
0,001/0,005 |
|
4 недели (Д28) |
7,660±1,420 |
5,260±1,356 |
0,001/0,002 |
|
6 недель (Д42) |
7,990±1,038 |
5,240±1,256 |
0,001/0,000 |
Рис. 1. Содержание эритроцитов в крови
Fig.1. Levels of red blood cells. Estimated marginal averages for Measure-1
Исходный уровень эритроцитов в опытной и контрольной группе (Д0) был на нижней границе нормы либо ниже референсных значений; согласно показателю критерия Манна-Уитни различия в группах незначимы. В ходе эксперимента у животных опытной группы уже через 2 недели данный показатель пришел в норму, тогда как в контрольной группе существенных изменений не было (рис.1). Статистически значимая разница между опытной и контрольной группами сохранялась до конца наблюдения (р=0,001). При этом наблюдаемая мощность многомерного критерия время*группа составила 97,9 %.
3. Показатель гематокрита, %, в крови у животных опытной и контрольной групп
3. Hematocrit index, %, in the blood of experimental and control animals
Срок исследования |
Норма |
Опытная группа (n=10) |
Контрольная группа (n=10) |
Значимость, р ANOVA/ Манна-Уитни |
Д0 (1) |
29,0…48,0 |
22,700±1,215 |
22,880±0,892 |
0,001/0,853 |
2 недели (Д14) |
32,180±9,151 |
22,430±1,153 |
0,001/0,052 |
|
4 недели (Д28) |
37,02±7,851 |
21,720±2,989 |
0,001/0,000 |
|
6 недель (Д42) |
36,250±8,364 |
21,340±2,892 |
0,001/0,000 |
Рис. 2. Показатель гематокрита
Fig. 2. Hematocrit index. Estimated marginal averages for Measure-1
В начале эксперимента уровень гематокрита в опытной и контрольной группе находился ниже нормы; согласно критерию Манна-Уитни, различия между группами незначимы. В ходе эксперимента у пациентов опытной группы уже через 2 недели данный показатель пришел в норму и находился в ее пределах до конца срока наблюдения, тогда как в контрольной группе существенных изменений не было и до конца опыта показатель гематокрита оставался ниже нормы (рис.2). Различия между группами статистически значимы, р=0,001. При этом наблюдаемая мощность многомерного критерия время*группа составила 98%.
4. Содержание гемоглобина, г/л, в крови у животных опытной и контрольной групп
4. Hemoglobin levels, g/l, in the blood of experimental and control animals
Срок исследования |
Норма |
Опытная группа (n=10) |
Контрольная группа (n=10) |
Значимость, р ANOVA/ Манна-Уитни |
Д0 (1) |
90…150 |
82,480±9,235 |
85,190±6,200 |
0,01/0,739 |
2 недели (Д14) |
91,900±17,791 |
85,630±5,990 |
0,01/0,315 |
|
4 недели (Д28) |
96,980±18,512 |
83,950±7,536 |
0,01/0,029 |
|
6 недель (Д42) |
99,830±17,237 |
80,420±8,414 |
0,01/0,003 |
Рис. 3. Содержание гемоглобина
Fig. 3. Hemoglobin levels. Estimated marginal averages for Measure-1
В начале эксперимента показатель гемоглобина в опытной и контрольной группах был ниже нормы; согласно критерию Манна-Уитни, различия в группах незначимы. В ходе эксперимента данный показатель в опытной группе достиг нижней границы нормы уже через 2 недели, постепенно возрастая к концу срока наблюдения, тогда как в контрольной уровень гемоглобина оставался ниже нормы в течение всего эксперимента (рис.3). Наблюдемая мощность многомерного критерия время*группа составила 90,4 %.
5. Содержание креатинина, ммоль/л, в сыворотке крови у животных опытной и контрольной групп
5. Serum creatinine levels, mmol/l, in experimental and control animals
Срок исследования |
Норма |
Опытная группа (n=10) |
Контрольная группа (n=10) |
Значимость, р ANOVA/ Манна-Уитни |
Д0 (1) |
45…140 |
304,9±130,679 |
319,2±150,045 |
0,001/0,739 |
6 недель (Д42) |
255,1±115,544 |
325,8±159,562 |
0,001/0,143 |
Рис.4. Содержание креатинина в сыворотке крови
Fig.4. Serum creatinine levels. Estimated marginal averages for Measure-1
Уровень креатинина в сыворотке крови животных опытной и контрольной групп был и оставался стабильно высоким; согласно критерию Манна-Уитни, различия между группами незначимы. Наблюдаемые у пациентов в Д0 показатели креатинина соответствуют стадии III по классификации IRIS (умеренная ренальная азотемия). Однако в опытной группе в ходе эксперимента удалось значительно снизить его уровень (рис.4). При этом наблюдаемая мощность многомерного критерия время*группа равна 96 %.
6. Содержание мочевины, ммоль/л, в сыворотке крови у животных опытной и контрольной групп
6. Serum urea levels, mmol/l, in experimental and control animals
Срок исследования |
Норма |
Опытная (n=10) |
Контрольная (n=10) |
Значимость, р ANOVA/ Манна-Уитни |
Д0 (1) |
4,0…8,5 |
16,700±6,499 |
13,7±3,780 |
0,075/0,247 |
6 недель (Д42) |
10,680±2,372 |
15,730±5,217 |
0,075/0,023 |
Рис. 5. Содержание мочевины в сыворотке крови
Fig. 5. Serum urea levels. Estimated marginal averages for Measure-1
Уровень мочевины у животных опытной и контрольной группы был и оставался выше референсных значений на всем протяжении эксперимента; согласно критерию Манна-Уитни, различия в группах незначимы. Однако в опытной группе удалось добиться существенного снижения данного показателя с 16,70 до 10,68 ммоль/л к концу наблюдения, тогда как в контроле уровень мочевины на Д42 составлял 15,73 ммоль/л (рис.5). Наблюдаемая мощность многомерного критерия время*группа составила 95 %.
Наличие ЭПО-дефицитной анемии у подопытных кошек, вызванной ХБП, определяли на основании снижения концентрации ЭПО ниже нормы, выведенной специально для данного исследования путем определения уровня ЭПО у 12 клинически здоровых кошек в возрасте от 1 до 5 лет обоего пола с ХБП 1-й степени по классификации IRIS (патологические изменения: такие, как протеинурия, гипостенурия и агранулоцитарная лейкоцитурия, регистрируются у этих животных только в анализах мочи).
Содержание ЭПО оценивали на момент включения в КИ (Д0), затем на 14-й (Д14) и 42-й (Д42) день. За референсный интервал нормальных значений принят уровень ЭПО, полученный при исследовании крови клинически здоровых кошек ‒ от 9 до 38 мЕ /мл [36, 38].
Исходный уровень ЭПО как в опытной, так и в контрольной группе был существенно ниже, чем у здоровых животных. В ходе эксперимента достигнуть нижней границы нормального значения не удалось, оцененные маргинальные показатели M±m составляли для контрольной группы 4,797±1,925, а для опытной 6,610±1,925. Наблюдаемая мощность многомерного критерия время*группа составила 15%. Полученные данные позволяют сделать вывод о том, что стимуляция показателей эритропоэза (повышение численности эритроцитов, увеличение показателя гематокрита и уровня гемоглобина), наблюдаемая под действием Гамавита, не связана со стимуляцией выработки эндогенного ЭПО.
Сравнительная оценка терапевтической эффективности двух схем лечения приведена в таблице 7.
7. Терапевтическая эффективность лечения кошек с ренальной анемией при ХБП III…IV стадии
7. Therapeutic effectiveness of treatment of cats with renal anemia in III…IV stage of CKD
Признак |
Опытная группа |
Контрольная группа |
Общее клиническое состояние |
||
Новые осложнения в общем состоянии |
Нет |
Нет |
Усугубление признаков почечной недостаточности |
Нет |
Нет |
Анализ мочи: |
||
снижение тяжести протеинурии |
Да |
Да |
снижение тяжести гипостенурии |
Да |
Да |
Анализ крови: |
||
повышение содержания ЭПО |
Нет |
Нет |
повышение показателя гематокрита |
Да* |
Нет |
повышение содержания гемоглобина |
Да* |
Нет |
повышение количества эритроцитов |
Да* |
Нет |
снижение уровня анизоцитоза эритроцитов |
Да* |
Нет |
повышение средней концентрации Hb в эритроцитах |
Да* |
Нет |
повышение среднего объема эритроцитов |
Да* |
Нет |
повышение среднего содержания Hb в эритроците |
Да* |
Нет |
снижение содержания креатинина в сыворотке крови |
Да |
Нет |
снижение содержания мочевины в сыворотке крови |
Да |
Нет |
* через 2 недели эксперимента
Ренальная анемия ― одно из многочисленных осложнений ХБП у кошек, значительно снижающее качество их жизни. Ренальная анемия, как правило, развивается у пациентов с тяжелыми деструктивными изменениями почечной паренхимы (обычно это процессы склерозирования не менее 75 % органа). По мере прогрессирования заболевания почек происходит потеря клеток почек, способных вырабатывать ЭПО. Развивается анемия, которая может усугубляться кровопотерей и укороченным сроком жизни эритроцитов вследствие уремического синдрома [14]. В подавляющем числе случаев нозологической формой нефропатии, приведшей к этому типу анемии, является именно ХБП [13, 29]. Ведущими механизмами развития и стойкости ренальной анемии являются:
ü недостаточность эндогенного ЭПО: как абсолютный дефицит этого гормона (снижение выработки почками), так и выраженное уменьшение активности его рецепторных взаимодействий (относительный дефицит);
ü сокращение срока жизни эритроцитов, во многом связанное с уремической интоксикацией; а уровень гемолиза, значительно превосходящий физиологическую норму (у здоровых животных в сутки разрушается/регенерируется не более 2 % эритроцитов), не только значимый этиологический фактор развития анемии, но и одна из причин, усугубляющих почечное поражение, поскольку гемоглобин, попадающий в первичную мочу, вызывает канальцевую деструкцию/дисфункцию, и без того являющуюся неотъемлемой частью патогенеза ХБП;
ü нарушение обмена железа, фолиевой кислоты и цианокобаламина в организме больных животных [13, 14, 36].
Анемия неизбежно приводит к развитию гипоксии тканей и органов, а также к снижению общей и специфической резистентности организма, при этом почки страдают от гипоксии достаточно серьезно, так как процессы реабсорбции в канальцевом аппарате этого органа требуют больших затрат кислорода и энергии. Таким образом, хроническая анемия приводит к усугублению тяжести ренальной гипертензии и других признаков, поэтому поиск средств, способных влиять на качественные и количественные показатели красной крови, при этом не обладающих нефротоксическими свойствами, является актуальной клинической проблемой [13].
Отечественные ветеринарные специалисты уже располагают успешным опытом применения Гамавита для коррекции анемии и детоксикации организма при ХБП [3, 4, 20]. В данных работах показано, что использование Гамавита способствовало как восстановлению красного ростка кроветворения, так и снижению повышенного уровня креатинина и мочевины в сыворотке крови кошек и собак. Немаловажно, что Гамавит также повышает естественную резистентность организма, стимулируя активность естественных киллеров и другие показатели [2, 5…7, 9, 12, 17, 22].
В настоящем КИ использование в течение 14 дней в процессе исследования Гамавита в экспериментальной группе привело к существенному улучшению большинства показателей красной крови, что является следствием стимулирующего влияния препарата на костномозговое кроветворение. Уже в Д14 отмечено возращение к норме численности эритроцитов, показателя гематокрита и содержания гемоглобина. Ранее различными исследователями было показано, что Гамавит лечит анемию и восстанавливает эритроидный росток гемопоэза при стрессе [5], врожденном дефиците железа [6], кровепаразитарных заболеваниях и гельминтозах собак [1, 12, 22, 24], кошек [1, 17, 26, 40], северных оленей [15, 28] и других животных [16], при экспериментальном токсикозе, вызванном антипаразитарными препаратами [21]. Также Гамавит стимулирует эритропоэз при макроцитарной анемии, вызванной фенилгидразином [27], для которой характерен анизо- и пойкилоцитоз, уменьшение концентрации гемоглобина и количества эритроцитов [11]. Поскольку механизм развития токсической анемии под действием фенилгидразина связан с блокадой связывания ЭПО с рецепторами, приводящей к нарушению сигнального пути JAK-STAT и подавлению созревания эритроцитов [37], можно предположить, что активные компоненты Гамавита воздействуют на JAK-STAT, повышая эффективность связывания ЭПО с рецепторами.
Поскольку в данном КИ показано, что Гамавит не способствует выработке эндогенного ЭПО при ренальной анемии, механизм стимуляции красного ростка кроветворения (численности эритроцитов, уровня гемоглобина и показателя гематокрита) скорее всего связан с ранее выявленной в эксперименте способности активных компонентов препарата стимулировать пролиферацию стволовых кроветворных клеток и/или ранних эритроидных предшественников [27].
Согласно полученным данным, подавлению эритропоэза, которое клинически проявляется эритропенией и анемией, может способствовать высокий уровень мочевины в крови [29]. В нашем КИ уровни креатинина и мочевины у пациентов опытной и контрольной групп были и оставались выше референсных значений на всем протяжении эксперимента, однако в группе с применением Гамавита удалось добиться существенного снижения данных показателей. Креатинин и мочевина постоянно продуцируются в организме, в связи с чем они являются одними из самых доступных для врачей в рутинной практике маркеров, указывающих на нарушение функции почек.
Важно отметить, что хотя уровни мочевины и креатинина не достигли нормы на Д42, качество жизни животных в опытной группе резко улучшилось, что может быть связано с системным снижением интоксикации организма животного. В ряде других работ с применением Гамавита также наблюдалась нормализация данных показателей [2…4, 12, 18, 20, 27]. Снижение показателей уремической интоксикации под действием Гамавита также может способствовать стимуляции красного ростка гемопоэза, поскольку при данной интоксикации срок жизни эритроцитов может сокращаться [33, 35].
Поскольку в процессе проведенного КИ у Гамавита не было выявлено каких-либо нефротоксичных свойств и нежелательных взаимодействий с препаратами стандартной нефропротективной терапии, то он может быть рекомендован одним из препаратов первого выбора для лечения ХБП III…IV стадий у кошек.
Результаты проведенного КИ у кошек с ЭПО дефицитной анемией на фоне ХБП III…IV стадии продемонстрировали эффективность использования Гамавита для стимуляции эритропоэза.
Гамавит может быть рекомендован к широкому использованию у кошек в качестве одного из патогенетических, симптоматических и лечебно-профилактических средств в комплексной терапии ХБП на доклинических и клинических этапах заболевания.
Поскольку ХБП является хроническим и неуклонно прогрессирующим заболеванием, рекомендовано дальнейшее исследование лечебно-профилактических свойств препарата Гамавит в терапевтических схемах, длительностью более 2-х недель и у пациентов с III…IVстепенью ХБП.
Выводы
1. Препарат «Гамавит® раствор для инъекций 10 мл» в рекомендованных производителем дозах оказывает положительное влияние на эритропоэз у кошек с ХБП III…IV стадией, а именно: достоверно повышает количество эритроцитов, уровень гематокрита и гемоглобина проявляя, таким образом, антиишемические и антигипоксантные свойства; повышает объем щелочного буфера крови и предупреждает развитие дыхательного и канальцевого ацидоза; уменьшает выраженность ряда клинических проявлений у пациентов с ХБП, связанных с дыхательной и сердечной недостаточностью;
2. Восстановление физиологически обусловленного уровня гематокрита в организме пациентов с III…IV степенями ХБП на фоне применения Гамавита привело к улучшению их общего состояния и регрессу ряда клинических проявлений.
3. Гамавит не обладает нефротоксическими свойствами у кошек с III…IV степенями ХБП и снижает показатели уремической интоксикации.
Конфликт интересов
Авторы заявляют о существовании конфликта интересов. А.В. Санин, А.Н. Наровлянский и А.В. Пронин являются разработчиками лекарств
1. Анников, В.В. Эффективность Гамавита при проведении дегельминтизации котят и щенков / В.В. Анников, А.В. Красников, А.В. Санин // Ветеринарная клиника. - 2018а - № 5. - С. 24-25.
2. Анников, В.В. Эффективность гамавита при терапии боррелиоза у собак / В.В. Анников, Л.В. Анникова, А.В. Санин, А.Н. Наровлянский, А.В. Пронин, В.Ю. Санина, Т.Н. Кожевникова // Ветеринария Кубани. - 2018б. - № 4. - С. 15-18.
3. Анников, В.В. Оценка терапевтической эффективности гамавита в составе комплексной терапии при лечении кошек на второй азотемической стадии хронической почечной недостаточности / В.В. Анников, Л.В. Анникова, М.А. Кольдяева, Е.С. Платицына Труды Всероссийского НИИ экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко. - 2018. - Т. 80. - № 2. - С. 14-17.
4. Бакулина, Е.А. Случай терапии хронической почечной недостаточности у кошек / Е.А. Бакулина // Труды Всероссийского НИИ экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко. - 2018. - Т. 80. - № 2. - С. 36-39.
5. Вишневская, Т.Я. Сравнительный анализ гематологических показателей крови при стрессе и его иммунокоррекция препаратом гамавит / Т.Я. Вишневская, Л.Л. Абрамова // Материалы одиннадцатой Сибирской ветеринарной конференции «Актуальные вопросы ветеринарной медицины», Тюмень 5-7 апреля 2012. - С. 59-60.
6. Глаголева, Т.И. Ферроглюкин и гамавит в коррекции антиагрегационных свойств сосудов у новорожденных телят с дефицитом железа / Т.И. Глаголева, С.Ю. Завалишина, И.Н. Медведев // Успехи современного естествознания. - 2013. - № 5. - С. 17.
7. Григорьева, Е.А. Воздействие препарата гамавит на активность естественных киллерных клеток / Е.А. Григорьева, А.В. Пронин, А.В. Санин, А.Н. Наровлянский, Т.Ю. Тимофеева, В.Ю. Санина, Т.Н. Степанова, Е.В. Герасимова, А.М. Иванова, Т.Н. Кожевникова // Ветеринария Кубани. - 2016. - № 4. - C. 27-28.
8. Гришина, Е.А. Биохимическое обоснование применения комплексной терапии в острой фазе экспериментальных гельминтозов животных / Е.А. Гришина, А.А. Еровиченков // Журнал инфектологии. - 2017. - Т. 9. - № 3. - С. 32-39.
9. Гришина, Е.А. Исследование активности окислительного стресса у животных в острой стадии гельминтоза и на фоне терапии / Е.А. Гришина // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. - 2017. - № 10. - С. 84-90.
10. Зарипова, Т.Е. Острое отравление у собаки: клинический случай / Т.Е. Зарипова, Е.А. Бакулина, С.Э. Жавнис // Ветеринарная клиника. - 2017. - № 8. - C. 10-12.
11. Козловская, К.С. Сравнительная характеристика костномозгового кроветворения и состава периферической крови при моделировании приобретенной токсической гемолитической анемии 2-бутоксиэтанолом и фенилгидразином / К.С. Козловская, М.В. Киланова, Е.А. Мамаева, П.В. Косарева, Е.И. Самоделкин // Сборник научных трудов «Актуальные проблемы медицины в России и за рубежом». - Новосибирск, 2016. - С. 68-71.
12. Леонард, Р.А. Влияние гамавита, фоспренила и максидина на ряд биохимических показателей крови собак, больных пироплазмозом / Р.А. Леонард // Ветеринарная клиника. - 2006. - № 3. - C. 2-5.
13. Леонард, Р.А. Рекомендации НАВНУ: Хроническая болезнь почек у собак и кошек - основополагающие принципы диагностики и скрининга / Р.А. Леонард // Режим доступа: http://vetnefro.ru/?r=pub&one=60.
14. Леонард, Р.А. Ренальная анемия: особенности этиопатогенеза и методы коррекции / Р.А. Леонард // Современная ветеринарная медицина. - 2017. - № 1. - C. 38-43.
15. Либерман, Е.Л. Опыт применения гамавита при лечении кровепаразитарных болезней северных оленей / Е.Л. Либерман, Х. Георгиу, В.В. Белименко // Российский ветеринарный журнал. СХЖ. - 2014. - № 4. - С. 31-33.
16. Обрывин, В.Н. Влияние препаратов гамавит и гала-вет на токсический иммунодефицит у белых крыс / В.Н. Обрывин, Г.А. Жоров, П.Н. Рубченков // Ветеринарная патология. - 2008. - № 3. - С. 119-125.
17. Переслегина, И.О. Эффективность применения гамавита при токсокарозе у кошек / И.О. Переслегина, Т.Н. Кожевникова // Известия Оренбургского аграрного университета. - 2018. - № 6(74). - С. 162-163.
18. Переслегина, И.О. Клинические случаи хронического отравления кошек: опыт применения препарата Гамавит / И.О. Переслегина, Т.С. Дубровина, Т.Ю. Клинцова, С.Н. Зотова, Т.Н. Кожевникова, А.В. Санин // Ветеринария Кубани. - 2017. - № 5. - С. 23-26.
19. Переслегина, И.О. Эффективность гамавита при отравлении кошки ивермектином /И.О. Переслегина // Школа науки. - 2018. - № 6. - С. 14-15.
20. Савойская, С.Л. Применение гемостимулятора и детоксиканта при лечении собак на III азотемической стадии хронической почечной недостаточности / С.Л. Савойская, Т.Н. Кожевникова, А.А. Санина // Европейское научное объединение. - 2019. - № 9-2 (55). - С. 116-117.
21. Саличев, А.В. Рандомизированное контролируемое двойное слепое исследование антитоксического действия гамавита и гамавитфорте в эксперименте in vivo с применением Имидокарба дипропионата / А.В. Саличев, С.В. Ожерелков, А.В. Изместьева, А.А. Виденина, А.В. Санин. // Ветеринария Кубани. - 2011. - № 6. - С. 22-25.
22. Самойлова, Е.С. Из опыта применения антиоксидантов в комплексной схеме лечения бабезиоза собак / Е.С. Самойлова, М.А. Дерхо // Ветеринарный врач. - 2009. - № 1. - С. 13-16.
23. Санин, А.В. Гамавит - эффективное средство при экстракорпускулярных анемиях / А.В. Санин // Ветеринарная клиника. - 2009. - № 4. - С. 16-19.
24. Санин, А.В. Особенности применения иммуномодуляторов при паразитарных инвазиях / А.В. Санин, О.Ю. Сосновская, В.Ю. Санина, Т.Н. Кожевникова, И.К. Васильев, А.Н. Наровлянский, А.В. Пронин // Ветеринария Кубани. - 2010. - № 2. - С. 15-18.
25. Санин, А.В. Протективный эффект Гамавита при острой интоксикации, вызванной четыреххлористым углеродом в эксперименте / А.В. Санин, С.В. Ожерелков, О.Ю. Сосновская, А.Н. Наровлянский, А.В. Пронин // Российский ветеринарный журнал. СХЖ. - 2015. - № 2. - С. 40-42.
26. Санин, А.В. Гамавит повышает эффективность терапии гемобартонеллеза (гемоплазмоза) у кошек: контролируемое исследование / А.В. Санин, А.Н. Наровлянский, А.В. Пронин, Т.Н. Кожевникова, А.Д. Агафонова, Л.В. Анникова, В.В. Анников // Российский ветеринарный журнал. - 2017. - № 2. - С. 28-32.
27. Санин, А.В. Гамавит для коррекции токсической гемолитической анемии и стимуляции эритропоэза / А.В. Санин, А.Н. Наровлянский, А.В. Пронин, Т.Н. Кожевникова, О.Ю. Сосновская, С.Э. Жавнис, С.В. Ожерелков, Д.А. Климова // Ветеринария. - 2018. - № 10. - С. 54-59.
28. Сибен, А.Н. Влияние иммуномодуляторов и антгельминтиков на состояние крови северных оленей / А.Н. Сибен, Е.Л. Либерман, Е.А. Силиванова // Вестник ветеринарии. - 2015. - № 3 (74). - С. 64-69.
29. Данн, М.Дж. Почечная эндокринология /М.Дж. Данн. - М.: Медицина, 1987. - 672 с.
30. Chalhoub, S. The use of Darbepoetin to stimulate erythropoiesis in anemia of kidney disease in cats: 25 Cases / S. Chalhoub, C.E. Langston, J. Farrelly // J. Vet. Intern. Med. - 2012 - No. 26(2) - pp. 363-369.
31. Chikazawa, S. A review of anaemia of inflammatory disease in dogs and cats / S. Chikazawa, Dunning M. // Journal of Small Animal Practice. - 2016. - No. 57(7). - pp. 348-353. DOI:https://doi.org/10.1111/jsap.12498
32. Cowgill, L.D. Use of recombinant human erythropoietin for management of anemia in dogs and cats with renal failure / L.D. Cowgill, K.M. James, J.K. Levy, J.K. Browne, A. Miller, R.T. Lobingier, J.C. Egrie // J Am Vet Med Assoc. - 1998 Feb - Vol. 15. - No. 212(4) - pp. 521-528.
33. Elliot, J. Feline chronic renal failure: clinical findings in 80 cases diagnosed between 1992 and 1995 / J. Elliot, P.J. Barber // J Small Anim Pract. - 1998. - No. 39. - pp. 78-85.
34. Erslev, A.J. Erythropoietin in the pathohologenesis and treatment of the anemia of chronic renal failure / A.J. Erslev, A. Besarab // Kidney Int. - 1997. - No. 51. - pp. 622-630.
35. Grauer, G.F. Treatment Guidelines for Chronic Kidney Disease in Dogs & Cats / G.F. Grauer // International Renal Interest Society Recommendations. http://iris-kidney.com/pdf/IRIS_Staging_of_CKD_modified_2019
36. Nephrology and urology of small animals / edited by Joe Bartges, David J. Polzin. Willey-Blackwell, 2011, 920 c.
37. Pandey, K. Molecular mechanism of phenylhydrazine induced haematotoxicity: a review / K. Pandey, A.K. Meena, A. Jain, R.K. Singh // American Journal of Phytomedicine and Clinical Therapeutics. - 2014. - Vol. 2. - No. 3. - pp. 390-394.
38. Pechereau, D. Plasma erythropoietin concentrations in dogs and cats: reference values and changes with anaemia and/or chronic renal failure / D. Pechereau, P. Martel, J.P. Braun // Res.Vet.Sci. - 1997. - Vol. 62. - Is. 2. - pp. 185-188.
39. Sanderson, S. Use of Erythropoietin and Calcitriol for Chronic Renal Failure in Dogs and Cats / S. Sanderson // WSAVA World congress proceedings, 2005, May 11-15, Mexico-city, Mexico. pp. 361-363.
40. https://zoosecrets.ru/anemiya-u-koshek-lechenie-preparaty.