Сокращения: ДВ ― действующее вещество, ЖКТ ― желудочно-кишечный тракт, ИХА ― иммунохроматографический анализ, ИФА ― иммуноферментный анализ, МКБ ― мочекаменная болезнь, МТ ― масса тела, ПЦР ― полимеразная цепная реакция, СТП ― стандарт предприятия, УЗИ ― ультразвуковое исследование.
Введение
Одной из частых причин обращения к ветеринарному врачу владельцев молодых кошек и котят служат различные нарушения функций ЖКТ, в частности владельцев сильно настораживают учащенная дефекация у их питомцев, а также появление слизи и крови в фекалиях. Обычно клиницисты назначают паразитологическое исследование фекалий; в большинстве случаев при микроскопии обнаруживаются вегетативные и цистные формы гиардий (Giardia spp).
Особенности эпизоотологии, патогенеза и морфологии возбудителя гиардиоза кошек на сегодняшний день достаточно хорошо изучены [5, 9…13]. Известно, что в условиях питомника у кошек инвазия может длительно циркулировать, становясь хронической и очаговой со спорадическими проявлениями диареи. Характерно, что кошки старше 2 лет мало восприимчивы к инвазии, у них может самопроизвольно прекращаться выделение простейших без четких клинических симптомов диареи [5…9]. Наиболее вероятно обнаружить гиардии у котят до 6-месячного возраста [10].
По литературным данным [11], простейшие вида Giardia duodenalis являются наиболее распространенным желудочно-кишечным паразитом у домашних кошек. Washabau R.J., Holt D.E. отмечают, что для гиардиоза характерна широкая вариабельность клинической картины дисфункций ЖКТ: от бессимптомного течения до развития острой диареи и энтерита с сопутствующими потерей МТ, снижением активности, аппетита [24]. Гиардиоз кошек, как и собак, широко распространен по странам и континентам [3, 10, 13, 17, 18, 22, 23, 25, 26]. Сравнительно недавно были получены данные об экстенсинвазированности собак и кошек городской популяции в одной из китайских провинций: Weida Pan с соавторами выявили, что 6 из 104 исследованных методами ПЦР и микроскопией проб были положительными по гиардиозу [25]. В опубликованных международных данных исследований по гиардиозу инцидентность инвазии у кошек различна, что, по всей видимости, обусловлено также методом детектирования антигена в патматериале. По данным Norma Labarthe et all., в Бразилии из 462 обследованных с помощью SNAP-теста (IDEXX) кошек у 15,4 % обнаруживали гиардиоз, у пожилых кошек в этом же тесте выявляли инвазию реже ― лишь у 4,4 % животных [17]. Исследования по фармакотерапии собак при лямблиозе с доказанным клиническим эффектом проводили в условиях стационара [2].
Таким образом, для диагностики гиардиоза у кошек приемлемы как классические паразитологические методы, так и качественные экспресс-тесты на выявление антигена в материале.
Однако в вопросах профилактики и лечения гиардиоза некоторые авторы расходятся во мнении: так, одни [11, 20, 21] указывают на терапевтическую эффективность метронидазола и фенбендазола в отношении жгутиковых, другие предостерегают относительно развития лекарственной резистентности гиардий к ним [4]. Кроме того, схемы лечения гиардиоза у собак не всегда эффективны у кошек [16, 27]. В связи с этим получение новых данных по клинической эффективности разрабатываемой терапии гиардиоза у котят и кошек, зараженных спонтанно, может представлять научно-практический интерес для клиницистов.
Цель исследования
Установить эффективную схему лечения гиардиоза у кошек с использованием антигельминтиков «Празицид®-суспензия Плюс» и «Дирофен® таблетки» (разработанных ООО «АПИ-САН», Россия), выявить роль возбудителя в развитии геморрагической диареи и иных расстройств ЖКТ; определить, как влияет устранение данного фактора из патологического процесса на общее клиническое состояние животных.
Материалы и методы
Исследования были проведены в Инновационном ветеринарном центре Московской ветеринарной академии им. К.И. Скрябина специалистами сети «Свой доктор» (г. Москва). Были использованы производственные образцы препаратов «Дирофен® таблетки» и «Празицид®-суспензия Плюс». Препараты использовались в модификациях для кошек из расчета 1 мл суспензии/кг МТ и 1 таблетка/5 кг МТ животного, что эквивалентно 15 мг фебантела (по ДВ)/кг МТ. Кратность применения определяли как минимальное число дней терапии ― 3-е суток с интервалом 24 ч и максимально ― до 5 суток с перерывом и повторным курсом по показаниям (у двух кошек). Различия в продолжительности введения препаратов связаны с индивидуальным течением патологического процесса, его клиническим проявлением.
Животные были отобраны в группы случайным образом из числа поступивших на обследование и имеющих ключевой клинический критерий ― наличие обоснованных жалоб владельцев на нарушение работы ЖКТ кошки в виде изменения дефекации и характера фекалий, наличие геморрагической диареи.
После обследования было сформировано две опытные группы по 7 и 9 животных в каждой, без значительных возрастных и весовых отклонений (допустимые отклонения составляли не более 10…20 %). Клиническое обследование выполняли по рекомендациям Mehlhern H. и других специалистов [14, 15, 19]. Микроскопию проводили на оборудовании Hospitex Diagnostics при увеличении 10 и 40. Материалом для исследования служили фекалии животных, взятые из прямой кишки. Готовили нативный мазок или исследовали пробы по методу Фюллеборна в модификации Дарлинга (1920). Для определения видовой принадлежности паразитических простейших использовали атлас [1].
Для верификации диагноза использовали экспресс-тесты: ИХА, диагностикумы (Vet Expert Giardia Ag), ПЦР в режиме «realtime» по СТП лаборатории «Зайцев+» (г. Москва), ИФА (SNAP-тест, IDEXX). Лабораторные экспресс-тесты проводили по методическим рекомендациям и инструкциям, приложенным к наборам диагностикумов, до и после лечения. Некоторым животным в протокол обследования были добавлены УЗИ, гематологический анализ, общий анализ мочи (по показаниям), а также тесты для исключения возможных сопутствующих вирусных инфекций.
Результаты и обсуждение
Развитие диареи, изменение внешнего вида фекалий, появление крови и большого количества слизи в большинстве случаях указывает на гиардиоз. Все кошки, включенные в данное пилотное исследование, имели вышеуказанные признаки диспепсических нарушений различной степени интенсивности. Помимо жалоб на участившуюся дефекацию питомцев, владельцы сообщали также о снижении аппетита, активности, изменениях в питании (появлении избирательности и привередливости к кормам). Все кошки в исследовании, за исключением двух, получали промышленный сертифицированный корм. Возраст животных варьировался от 2 до 18 месяцев (или 81,25 %) и 3 кошки были старше 5 лет.
При первичном обследовании выявляли такие общие клинические симптомы, как учащение дефекации (до 4…5 раз в сутки), размягчение стула до неоформленной кашеобразной субстанции с включением большого количества слизи, появление капель крови при завершении дефекации, болезненность при пальпации, напряжение брюшной стенки и метеоризм. У отдельных животных отмечали анемичность видимых слизистых оболочек (у 31,25 %), которая подтверждалась гематологическими исследованиями (выявляли снижение содержания гемоглобина на 10…30 % от среднего значения по подгруппе). Также при анализе гематологических показателей у двух кошек выявили умеренный лейкоцитоз и сдвиг ядра влево. Животным перед экспериментом проводили комплексные исследования на выявление возбудителей калицивироза, панлейкопении, коронавирусной инфекции и герпеса. У 9 кошек была выявлена положительная реакция на коронавирус по форме носительства.
Клиническое состояние всех кошек с гиардиозом во время первичного обследования в условиях стационара было удовлетворительным, без выраженного угнетения. У трех кошек наблюдали периодическую рвоту, а при дополнительных исследованиях (УЗИ, физико-химическое исследование мочи, биохимическое исследование крови) выявляли неинфекционные системные патологии органов пищеварения и мочевыделения (гепатопатия, панкреатит, дуоденит, МКБ). При гематологическом исследовании у трех кошек обнаружили эозинофилию (до 22 %) и лейкопению (снижение на 38 % от нижней границы нормы). Термометрия животных до и во время исследования не выявила значимых отклонений: колебания по группам составили от 37,6 до 39,2 °С. Причем значение 37,6 °С у одной из кошек можно характеризовать как гипотермию на фоне обезвоживания. У этой кошки при клиническом осмотре отмечали сниженный тургор кожи, анемичность, общую вялость, уменьшение активности в сочетании с частой дефекацией (5 раз в сутки и более). При оценке состояния кожно-волосяного покрова у 9 кошек выявляли снижение тургора, дегидратацию в легкой степени и тусклую шерсть. При аускультации и исследовании сердечнососудистой системы патологий не выявляли до и после исследования (скорость наполнения капилляров соответствовала нормальным значениям ― от 1,0 до 1,3 с). При пальпации обнаружили у двух кошек увеличение паховых лимфоузлов и у одной кошки ― подчелюстного лимфоузла, что, может быть связано с их положительным статусом вирусоносителя.
У 5 кошек при копроскопическом исследовании кроме гиардий выделили микробные ассоциации, состоящие из палочковидных и спиралевидных форм (до 40 % в полях зрения), у двух кошек выявили дрожжеподобные колонии и еще у двух животных ― изоспоры Isospora spp и нематод Toxocara mystax.
Результаты паразитологических исследований были следующими: у 5 кошек интенсивность инвазии гардиями составила от 6 до 10 вегетативных и цистных форм в поле зрения (31,25 %), у 50 % кошек ―от 3 до 6 паразитов, у остальных ― менее 2 паразитов при микроскопии (рис.).
Рис. Микропрепарат. Нативный мазок. Giardia spp. х 1000
Fig. Micropreparation. Native smear. Giardia spp. х1000
Результаты микроскопии подтверждались положительными результатами экспресс-тестов (независимо от метода и производителя диагностикума: ИХА, ИФА или ПЦР).
После оценки клинического статуса и определения интенсивности цистовыделения все испытуемые кошки были случайным образом разделены на две группы, каждая из которых получала свое специфическое противопаразитарное лечение препаратами «Празицид®-суспензия Плюс» и «Дирофен® таблетки», соответственно. Содержание ДВ фебантела в мг в этих препаратах было эквивалентным.
При повторном исследовании после лечения, на 7…10-е сутки, в группе кошек, которым применяли препарат«Празицид®-суспензия Плюс», отмечен наилучший клинический эффект, все животные по результатам копрологических исследований были свободны от Giardia spp., Isospora spp. и Toxocara mystax.
В группе животных, получавших«Дирофен® таблетки», у одной кошки были обнаружены цисты после лечения, но в гораздо меньшем количестве, чем при первоначальной инвазии. Кошку пролечили повторно до получения отрицательного результата микроскопии. Таким образом, терапевтическая эффективность антигельминтиков составила от 85,7 до 100 % в отношении спонтанно инвазированных кошек.
При повторном клиническом осмотре обращали внимание на состояние брюшной стенки, наличие метеоризма, болезненной дефекации, на характер стула и число испражнений в сутки. В группе кошек, получавших«Празицид®-суспензия Плюс», мы отмечали выраженный положительный эффект, а именно: число дефекаций сократилось до физиологической нормы (1…2 раза в сутки), фекалии приобрели оформленный вид, естественный цвет и запах, свойственный виду. После лечения в фекалиях животных не обнаруживали прожилок крови и слизи. При пальпации брюшной стенки напряжения и болезненности не отмечали, слабо выраженный метеоризм сохранялся только у одной кошки. На фоне лечения у животных улучшилось состояние кожи и шерсти, количество перхоти сократилось, признаки анемии также не проявлялись. Повторные экспресс-тесты были отрицательными.
В группе кошек, получавших антигельминтные таблетки, мы также отмечали положительный клинический эффект, число дефекаций объективно сократилось у всех животных (p<0,05), фекалии приобрели более оформленный вид, стали менее зловонными, без слизистых прожилок и крови.
Выводы
Результаты пилотного исследования показали возможность клинического применения препаратов «Празицид®-суспензия Плюс» и «Дирофен® таблетки» для купирования геморрагической диареи у кошек, ассоциированной с гиардиозом. Также следует указать, что диарея может носить полиэтиологический характер, в частности, некоторым животным потребовалась комплексная противомикробная терапия для полного выздоровления. В данном исследовании для лечения геморрагической диареи мы использовали разную продолжительность курсового введения предложенных антигельминтиков, в большинстве случаев эффективности удавалось достичь при трехкратном курсовом применении.
Конфликт интересов
Производителем антигельминтиков «Дирофен® таблетки» и «Празицид®-суспензия Плюс» для ветеринарного применения и спонсором данного исследования является ООО «Апиценна». Решение о публикации результатов научной работы принадлежит разработчику ООО «АПИ-САН».
