ANTIMICROBIAL SUSCEPTIBILITY OF PORCINE BACTERIAL PATHOGENS
Abstract and keywords
Abstract (English):
A retrospective review of antimicrobial susceptibility to the fluoroquinolones and potentiated sulfonamides of 120 isolates of the most typical porcine bacterial pathogens isolated from animals of different age groups from 2009 to 2019 at FGBI «ARRIAH» was carried out. According to the results, P. multocida, H. parasuis are highly susceptible to enrofloxacin, which can be used for empirical treatment of pasteurellosis and Glasser's disease. A. pleuropneumoniae and S. suis are also susceptible to enrofloxacin, so it can be recommended for the treatment of A. pleuropneumonia and streptococcosis. 50% of isolates of S. suis isolated from the brain tissues are susceptible to the potentiated sulfonamides, so this medication can be recommended for the treatment of streptococcosis only after susceptibility testing.

Keywords:
infectious diseases of pigs, antibiotics, enrofloxacin, trimethoprim, sulfanilamide, Streptococcus suis, Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus parasuis, P. multocida.
Text
Publication text (PDF): Read Download

Сокращения: АБП ― антибактериальные препараты, ГЭБ ― гематоэнцефалический барьер, ДВ ― действующее вещество, КОЕ ― колониеобразующие единицы, CLSI ― Clinical and Laboratory Standards Institute (Институт клинических и лабораторных стандартов)

 

Введение

Динамичное развитие свиноводства в России ставит перед ветеринарной наукой ряд задач, связанных с совершенствованием средств специфической профилактики и лечения инфекционных болезней. Большое значение приобретает этиотропная терапия, и в первую очередь использование АБП, позволяющих значительно снизить ущерб, причиняемый заболеваниями бактериальной этиологии.

 

Цель исследования

Работа представляет собой ретроспективный обзор чувствительности изолятов возбудителей бактериальных болезней свиней, выделенных в Российской Федерации в период с 2014 по 2019 гг. в ФГБУ «ВНИИЗЖ», к следующим АБП:

ü    энрофлоксацину — ДВ лекарственного препарата для ветеринарного применения под торговой маркой Энроксил®;

ü    ко-тримоксазолу (потенцированный сульфаниламид) — ДВ лекарственного препарата для ветеринарного применения под торговой маркой Трисульфон®.

Данная информация необходима для разработки и применения научно-обоснованных подходов к лечению животных, сдерживанию появления и распространения антибиотикоустойчивых микробов в хозяйствах.

 

Материалы и методы

Проведен анализ антибиотикочувствительности 120 изолятов/штаммов возбудителей болезней свиней, из них: Pasteurella multocida ― 30; Haemophillus parasuis ― 30; Actinobacilluspleuropneumoniae ― 30 и Streptococcus suis ― 30.

Чувствительность к АБП тестировали диско-диффузионным методом по рекомендациям CLSI [1]. В работе использовали диски АБП: энрофлоксацин ― 5 мкг и ко-тримоксазол ― 25 мкг, производства НИЦФ, Санкт-Петербург.

Чувствительность изолятов/штаммов пастерелл и стрептококков к АБП определяли на питательном агаре Мюллера-Хинтон (Himedia); чувствительность изолятов гемофильных бактерий, в том числе возбудителей актинобациллезной плевропневмонии, к АБП ― на питательном агаре Мюллера-Хинтон с добавлением сыворотки крови лошади и V-фактора роста (никотинамид аденин динуклеотид). Бактериальные суспензии изолятов/штаммов готовили на фосфатно-буферном солевом растворе из суточных агаровых культур. Оптическая плотность каждого инокулюма перед использованием составляла 0,5 ед. по шкале МакФарланда, что соответствовало концентрации 1,5×108 КОЕ/см3. Посевы с дисками АБП инкубировали в течение 24 ч при температуре 37 оС. Диаметр зоны ингибирования роста культур измеряли с помощью штангенциркуля и выражали в миллиметрах. Категории чувствительности (чувствительный или резистентный), указанные в таблице 1, определяли путем сравнения зоны задержки роста каждого изолята с рекомендациями CLSI [1].

1.                  Интерпретация чувствительности возбудителей бактериальных заболеваний свиней к энрофлоксацину и ко-тримоксазолу диск-диффузионным методом

Interpretation of antimicrobial susceptibility of bacterial pathogens to enrofloxacin and co-trimoxazole by disk diffusion method

 

Бактерии

Диаметр зоны задержки роста, мм

 

Энрофлоксацин

Ко-тримоксазол

чувствительный

резистентный

чувствительный

резистентный

A. pleuropneumoniae

 

 

≥21

 

 

≤16

 

 

≥16

 

 

≤10

Haemophilus parasuis

Pasteurella multocida

Streptococcus suis

 

Для оценки воспроизводимости и точности процедуры определения чувствительности к АБП параллельно с испытуемыми изолятами в качестве эталонов использовали коллекционные штаммы. Даты исследований и характеристика изолированных от свиней штаммов, а также информация о коллекционных штаммах, представлена в табл. 2…5.

 

2.      Перечень изолятов/штаммов Pasteurella multocida от свиней

List of Pasteurella multocida isolates/strains from pigs

№ п/п

Изолят/штамм

Серогруппа

Дата выделения (получения)

Орган выделения

Возраст животного, сутки

1

Изолят

 

А

25.08.2009

Легкие

125

2

»

А

13.09.2010

»

65

3

»

(DNT+)

12.03.2011

Носовые ходы

75

4

»

А

12.03.2011

Легкие

145

5

»

D

04.02.2013

н/у

100

6

»

А

05.10.2014

Легкие

95

7

»

А

05.02.2015

»

60

8

»

А

11.11.2016

»

70

9

»

А

02.04.2016

»

120

10

»

D

30.04.2016

»

65…120

11

»

А

05.06.2016

»

140

12

»

А

28.06.2016

»

120

13

»

А

03.03.2017

»

162

14

»

А

08.03.2017

»

90

15

»

А

25.03.2017

»

235

16

»

А

15.04.2017

»

60

17

»

А

28.05.2017

»

45

18

»

А

11.06.2107

»

60…80

19

»

А

24.09.2017

»

57

20

»

А

24.09.2017

»

160

21

»

А

16.09.2017

»

46

22

»

А

21.09.207

»

135…138

23

»

А

23.11.2018

»

н/у

24

»

А

21.11.2018

»

120…150

25

»

А

29.11.2018

»

н/у

26

»

А

11.12.2018

»

50…55

27

»

А

17.12.2018

»

60…130

28

Штамм№1231

А

-

-

-

29

Штамм №9

D

-

-

-

30

ШтаммKobe-6

D

-

-

-

Примечание: н/у ― не указан

 

3.      Перечень изолятов/штаммов Haemophillus parasuis от свиней

List of isolates/strains of Haemophilus parasuis from pigs

 

№ п/п

Изолят/штамм

Серотип

Дата выделения (получения)

Орган выделения

Возраст животного, сутки

1

Изолят

 

н/о

13.06.2008

Легкие

35

2

»

н/о

18.04.2008

»

48

3

»

5

12.05.2009

»

25…35

4

»

н/о

25.08.2009

»

58…65

5

»

5

02.04.2010

»

30…45

6

»

4

09.03.2011

»

68

8

»

н/о

12.10.2012

»

40…60

9

»

н/о

13.08.2013

»

56

10

»

н/о

15.09.2013

»

38…46

11

»

5

02.03.2014

»

65

12

»

н/о

23.10.2014

»

50…70

13

»

н/о

14.04.2015

»

60…90

14

»

н/о

05.06.2015

»

40…55

15

»

н/о

02.10.2015

»

65

16

»

н/о

08.11.2015

»

48…52

17

»

5

12.03.2016

»

45

18

»

н/о

25.06.2016

»

35…45

19

»

н/о

03.07.2016

»

60…75

20

»

н/о

11.09.2016

»

50

21

»

н/о

03.02.2017

»

35…55

22

»

н/о

18.04.2017

»

65

23

»

н/о

22.12.2017

»

30…45

24

»

5

13.03.2018

Головной мозг

40…80

25

»

н/о

06.06.2018

Легкие

35

26

»

5

11.12.2018

»

50…55

27

Штамм Nagasaki

5

18.06.2015

-

-

28

Штамм SW-124

4

18.06.2015

-

-

29

Штамм №19417

4

20.04.2014

-

-

30

Штамм «Уральский»

5

-

Легкие

45

Примечание: н/о ― не определен.

 

4.      Перечень изолятов/штаммов Actinobacillus pleuropneumoniae

List of isolates/strains of Actinobacillus pleuropneumoniae

№ п/п

Изолят/штамм

Серотип

Дата выделения

 

Орган выделения

Возраст животного, сутки

1

Изолят

9

25.08.2009

Легкие

125

2

»

2

03.10.2009

»

105

3

»

8

22.04.2009

»

80

4

»

10

18.07.2009

»

75

5

»

10

05.10.2009

»

120

6

»

2

03.04.2010

»

85

7

»

7

11.09.2010

»

148

8

»

8

12.05.2011

»

112

9

»

7

16.04.2013

»

125

10

»

6

16.04.2013

»

70…90

11

»

7

05.04.2014

»

105

12

»

6

04.11.2014

»

69

13

»

2

12.02.2015

»

70…80

14

»

9

12.03.2016

Селезенка

35

15

»

5

11.11.2016

Легкие

70

16

»

5

02.04.2016

»

120

17

»

5

15.01.2017

»

140

18

»

2

10.02.2017

»

163

19

»

5

03.03.2017

»

100

20

»

5

25.03.2017

»

80…120

21

»

5

03.03.2017

»

92…127

22

»

2

15.03.2017

»

90…130

23

»

2

07.05.2017

»

100

24

»

н/о

24.04.2018

»

72

25

»

8

06.06.2018

»

105

26

»

5

21.08.2018

»

110

27

»

н/о

21.11.2018

»

120…150

28

»

10

03.12.2018

»

н/у

29

»

2

21.02.2019

»

70…190

30

Штамм «Ш-1»

2

03.06.2011

»

110

31

Штамм №29089

2

18.10.2011

-

-

 

5.      Происхождение изолятов/штаммов Streptococcus suis

Origin of isolates/strains of Streptococcus suis

№ п/п

Изолят/штамм

Дата выделения (получения)

Орган выделения

Возраст животного, сутки

1

Изолят

12.06.2013

Сустав

60

2

»

13.08.2013

»

50

3

»

15.03.2014

»

75

4

»

03.11.2014

»

40…50

5

»

10.02.2015

Селезенка

45

6

»

03.04.2015

»

150

7

»

20.05.2015

Сустав

50

8

»

21.05.2015

»

110

9

»

27.11.2015

Головной мозг

50

10

»

27.01.2016

Печень, селезенка

1…2

11

»

15.04.2016

Головной мозг

65

12

»

28.05.2016

Селезенка

20

13

»

18.06.2016

Головной мозг

55

14

»

05.08.2016

»

30…35

15

»

23.11.2016

»

63

16

»

18.02.2017

Селезенка

35

17

»

01.03.2017

Головной мозг

60

18

»

15.04.2017

Селезенка

53

19

»

03.05.2017

Сустав

21

20

»

06.05.2107

»

21

21

»

08.05.2107

Селезенка

35

22

»

09.07.2017

Печень, селезенка

42

23

»

02.08.2017

Селезенка

5

24

»

24.04.2017

Сустав

50

25

»

27.04.2017

Головной мозг

50…60

26

»

05.06.2018

»

10…15

27

»

03.06.2018

»

34…38

28

»

11.10.2018

»

30…35

29

Штамм «КА-2»

02.03.2015

»

55»

30

Штамм №43765

03.08.2016

-

-

 

Результаты

 

Результаты приведены в таблицах. Все 27 исследуемых изолятов Pmultocida проявили чувствительность к энрофлоксацину (рис. 1). Из 28 изолятов Apleuropneumoniae резистентность к энрофлоксацину выявлена у 5 (17,8 %). Из 26 изолятов Hparasuis резистентность к энрофлоксацину обнаружена у 2 (7,69 %).

 

 

Рис. 1. Чувствительность изолятов PmultocidaApleuropneumoniae и Hparasuis к энрофлоксацину

Fig. 1. Susceptibility of P. multocida, A. pleuropneumoniae and H. parasuis isolates to enrofloxacin

 

Из 28 исследуемых изолятов Ssuis резистентность к энрофлоксацину проявили 4 (14,28 %) (рис. 2). В тоже время к ко-тримоксазолу резистентность обнаружена у 15 (53,7 %) изолятов. Необходимо отметить, что у 3 (10,71 %) изолятов стрептококка выявлена резистентность сразу к обоим АБП.

 

 

Рис. 2 Чувствительность изолятов Streptococcus suis к энрофлоксацину и ко-тримоксазолу

Fig. 2. Susceptibility of Streptococcus suis isolates to enrofloxacin and co-trimoxazole

Одним из частых проявлений стрептококковой инфекции поросят служит менингит, и одной из целей ретроспективного анализа была оценка чувствительности изолятов S. suis к энрофлоксацину и комбинации «триметоприм-сульфамонометоксин». Данные АБП были выбраны исходя из их фармакологических характеристик: бактерицидное действие в отношении широкого спектра микроорганизмов, быстрое всасывание в кровь и проникновение через ГЭБ.

В связи с этим отдельно оценивали чувствительность изолятов Ssuisвыделенных из головного мозга свиней. Из 10 изолятов Ssuisвыделенных из головного мозга свиней, резистентность к энрофлоксацину проявили 2 (20 %), а к ко-тримоксазолу ― 5 (50 %) (рис. 3).

Рис. 3 Чувствительность изолятов Streptococcus suis, выделенных из головного мозга свиней к энрофлоксацину и котримоксазолу

Fig. 3. Susceptibility of Streptococcus suis isolated from swine brain tissues to enrofloxacin and co-trimoxazole

 

Заключение

1. Энрофлоксацин (в частности, препараты под торговой маркой Энроксил®) можно рекомендовать для проведения эмпирической антимикробной терапии пастереллеза и гемофилезного полисерозита свиней.

2. Эффективное использование энрофлоксацина (в частности, препаратов под торговой маркой Энроксил®) для лечения актинобациллезной плевропневмонии и стрептококкоза свинейвозможно только после установления чувствительности возбудителя к данному препарату.

3. Эффективное использование сульфаниламидных препаратов (в частности, препаратов под торговой маркой Трисульфон®) для лечения менингитной, суставной и септической форм стрептококкоза свиней, возбудителем которого является Streptococcus suis, возможно только после установления чувствительности возбудителя к данному препарату.

 

Конфликт интересов

Компания ООО «КРКА ФАРМА» действует в интересах KRKA dd. ― производителя лекарственных средств под торговой маркой Энроксил® (энрофлоксацин), Трисульфон®  (триметоприм/сульфамонометоксин)

 

References

1. Performance standards for antimicrobial disc and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals; approved standard, Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) Waine, PA, Third Ed., M31-A3, 2008, Vol. 22, No. 6.

Login or Create
* Forgot password?