ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ИЗОЛЯТОВ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ЗАБОЛЕВАНИЙ СВИНЕЙ И КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА К МАРБОФЛОКСАЦИНУ
Аннотация и ключевые слова
Аннотация (русский):
Проведен ретроспективный обзор чувствительности к антимикробным препаратам из группы фторхинолонов 134 изолятов наиболее типичных возбудителей бактериальных болезней свиней, 74 изолята возбудителей респираторных болезней крупного рогатого скота (КРС) и 101 изолят возбудителей мастита КРС, выделенных на базе ФГБУ «ВНИИЗЖ» от животных различных возрастных групп в период с 2014 по 2019 год. Возбудители респираторных заболеваний свиней P. multocida, A. pleuropleumoniae, H. parasuis проявили высокую чувствительность к марбофлоксацину, в связи с чем его можно рекомендовать для лечения респираторных инфекций свиней. Возбудители респираторных болезней КРС также проявили высокую чувствительность к марбофлоксацину и его можно рекомендовать для лечения бактериальных инфекций крупного рогатого скота.

Ключевые слова:
респираторные заболевания, антимикробная чувствительность, фторхинолоны, марбофлоксацин, крупный рогатый скот, комплекс респираторных болезней, мастит, Марфлоксин®
Текст
Текст (PDF): Читать Скачать

Сокращения: АБП ― антибактериальные препараты, ДНК ― дезоксирибонуклеиновая кислота, КОЕ ― колониеобразующие единицы, КРС ― крупный рогатый скот, CLSI ― Clinical and Laboratory Standards Institute (Институт клинических и лабораторных стандартов. Ранее ― National Committee for Clinical Laboratory Standards, NCCLS ― Национальный комитет по клиническим и лабораторным стандартам)

 

Введение

Динамичное развитие животноводства в России ставит перед ветеринарной наукой ряд задач, связанных с совершенствованием средств специфической профилактики и лечения инфекционных болезней свиней и КРС. Большое значение приобретает этиотропная терапия, и в первую очередь использование антибиотиков, позволяющих значительно снизить ущерб, причиняемый заболеваниями бактериальной этиологии.

Марбофлоксацин относится к антибактериальным препаратам группы фторхинолонов III поколения, разработанный специально для ветеринарии. Препарат обладает широким спектром бактерицидного действия, основанного на подавлении бактериальных ферментов ДНК-гиразы и топоизомеразы IV, участвующих в репликации ДНК микроорганизмов.

 

Цель исследования

Определить чувствительность изолятов возбудителей респираторных заболеваний свиней и КРС, а также возбудителей мастита КРС, выделенных в хозяйствах Российской Федерации за период 2014‒2019 гг, к марбофлоксацину. Данная информация необходима для разработки и применения научно-обоснованных подходов к лечению животных, сдерживанию появления и распространения антибиотикоустойчивых возбудителей в хозяйствах.

 

Результаты

Проведен анализ антибиотикочувствительности:

ü    134 изолята/штамма возбудителей респираторных болезней свиней. Из них: Pasteurella multocida ― 32; Haemophillus parasuis ― 30; Actinobacillus pleuropneumoniae ― 37 и Streptococcus suis ― 35;

ü    74 изолята/штамма возбудителей респираторных болезней КРС. Из них: Pasteurella multocida ― 31; Mannheimia haemolytica ― 35 и Haemophilus (Histophilus) somnus (somni) ― 8.

ü    101 изолят возбудителей мастита КРС. Из них: Streptococcus agalactiae ― 48; Streptococcus disgalactiae ― 4, Streptococcus uberis ― 8, Staphylococcus aureus ― 22, Staphylococcus hyicus ― 2, Staphylococcus haemolyticus ― 1, Trueperella (Actinomyces) pyogenes ― 8, Escherichia coli ― 7, Pseudomonas aeruginosa ― 1.

Чувствительность к АБП тестировали диско-диффузионным методом по рекомендациям CLSI (США). В работе использовали диски марбофлоксацина (5 мкг) производства компании BDBBLтм, США.

Чувствительность изолятов/штаммов возбудителей к антибиотику определяли на питательном агаре Мюллера-Хинтон (Himedia); чувствительность изолятов гемофильных бактерий к АБП ― на питательном агаре Мюллера-Хинтон с добавлением сыворотки крови лошади, V-фактора роста (никотинамидадениндинуклеотид). Бактериальные суспензии изолятов/штаммов готовили на фосфатно-буферном солевом растворе из суточных агаровых культур. Оптическая плотность каждого инокулюма перед использованием составляла 0,5 ед. по шкале МакФарланда, что соответствовало концентрации 1,5×108 КОЕ/см3. Посевы с дисками АБП инкубировали в течение 24 ч при температуре (36,5±0,5)оС. Диаметр зоны ингибирования роста культур измеряли с помощью штангенциркуля и выражали в миллиметрах. Категории чувствительности (чувствительный, промежуточный или резистентный) определяли путем сравнения зоны задержки роста каждого изолята с рекомендациями Национального комитета по Клиническим Лабораторным Стандартам [1]. Диаметр зоны задержки роста чувствительных изолятов составляет ≥20 мм, промежуточных ― 15…19 мм, резистентных ― ≤14 мм.

Для оценки воспроизводимости и точности процедуры определения чувствительности к АБП параллельно с испытуемыми изолятами в качестве эталонов использовали коллекционные штаммы.

 

1.      Перечень изолятов/штаммов Pasteurella multocida от свиней

List of isolates/strains of Pasteurella multocida from pigs

 

№ п/п

Изолят/штамм

Серогруппа

Дата выделения (получения)

Орган выделения

Возраст, сутки

1

Изолят

А

25.08.2009

Легкие

125

2

»

А

13.09.2010

»

65

3

»

D (DNT+)

12.03.2011

Носовые смывы

75

4

»

А

12.03.2011

Легкие

145

5

»

D

04.02.2013

н/у

100

6

»

А

05.10.2014

Легкие

95

7

»

А

05.02.2015

»

60

8

»

А

11.11.2016

»

70

9

»

А

02.04.2016

»

120

10

»

D

30.04.2016

»

65…120

11

»

А

05.06.2016

»

140

12

»

А

28.06.2016

»

120

13

»

А

03.03.2017

»

162

14

»

А

08.03.2017

»

90

15

»

А

25.03.2017

»

235

16

»

А

15.04.2017

»

60

17

»

А

28.05.2017

»

45

18

»

А

11.06.2017

»

60…80

19

»

А

24.09.2017

»

57

20

»

А

24.09.2017

»

160

21

»

А

16.09.2017

»

46

22

»

А

21.09.2017

»

135…138

23

»

А

23.11.2018

»

н/у

24

»

А

21.11.2018

»

120…150

25

»

А

29.11.2018

»

н/у

26

»

А

11.12.2018

»

50…55

27

»

А

17.12.2018

»

60…130

29

»

А

19.03.2019

»

280…870

30

Штамм №1231

А

-

-

-

31

Штамм №9

D

-

-

-

32

Штамм Kobe-6

D

-

-

-

Примечание: н/у ― не указан.

 

2.      Перечень изолятов/штаммов Haemophillus parasuis от свиней

List of isolates/strains of Haemophilus parasuis from pigs

 

№ п/п

Изолят/штамм

Серотип

Дата выделения (получения)

Орган выделения

Возраст, сутки

1

Изолят

н/о

13.06.2008

Легкие

35

2

»

н/о

18.04.2008

»

48

3

»

5

12.05.2009

»

25…35

4

»

н/о

25.08.2009

»

58…65

5

»

5

02.04.2010

»

30…45

6

»

4

09.03.2011

»

68

8

»

н/о

12.10.2012

»

40…60

9

»

н/о

13.08.2013

»

56

10

»

н/о

15.09.2013

»

38…46

11

»

5

02.03.2014

»

65

12

»

н/о

23.10.2014

»

50…70

13

»

н/о

14.04.2015

»

60…90

14

»

н/о

05.06.2015

»

40…55

15

»

н/о

02.10.2015

»

65

16

»

н/о

08.11.2015

»

48…52

17

»

5

12.03.2016

»

45

18

»

н/о

25.06.2016

»

35…45

19

»

н/о

03.07.2016

»

60…75

20

»

н/о

11.09.2016

»

50

21

»

н/о

03.02.2017

»

35…55

22

»

н/о

18.04.2017

»

65

23

»

н/о

22.12.2017

»

30…45

24

»

5

13.03.2018

Головной мозг

40…80

25

»

н/о

06.06.2018

Легкие

35

26

»

5

11.12.2018

»

50…55

27

Штамм Nagasaki

5

18.06.2015

-

-

28

Штамм SW-124

4

18.06.2015

-

-

29

Штамм №19417

4

20.04.2014

-

-

30

Штамм «Уральский»

5

-

Легкие

45

Примечание: н/о ― не определен.

 

3.      Перечень изолятов/штаммов Actinobacillus pleuropneumoniae от свиней

List of isolates/strains of Actinobacillus pleuropneumoniae from pigs

 

Изолят/штамм

Серотип

Дата выделения (получения)

 

Орган выделения

Возраст, сутки

1

Изолят

9

25.08.2009

Легкие

125

2

»

2

03.10.2009

»

105

3

»

8

22.04.2009

»

80

4

»

10

18.07.2009

»

75

5

»

10

05.10.2009

»

120

6

»

2

03.04.2010

»

85

7

»

7

11.09.2010

»

148

8

»

8

12.05.2011

»

112

9

»

7

16.04.2013

»

125

10

»

6

16.04.2013

»

70…90

11

»

7

05.04.2014

»

105

12

»

6

04.11.2014

»

69

13

»

9

12.03.2016

Селезенка

35

14

»

5

11.11.2016

Легкие

70

15

»

5

02.04.2016

»

120

16

»

5

15.01.2017

»

140

17

»

2

10.02.2017

»

163

18

»

5

03.03.2017

»

00

19

»

5

25.03.2017

»

80…120

20

»

5

03.03.2017

»

92…127

21

»

2

15.03.2017

»

90…130

22

»

2

07.05.2017

»

100

23

»

н/о

24.04.2018

»

72

24

»

8

06.06.2018

»

105

25

»

5

21.08.2018

»

110

26

»

н/о

21.11.2018

»

120…150

27

»

10

03.12.2018

»

н/у

28

»

2

21.02.2019

»

70…190

29

»

н/о

19.03.2019

»

21…126

30

»

2

25.03.2019

»

н/у

31

»

2

27.03.2019

»

152

32

»

5

08.05.2019

»

30…45

33

»

5

31.05.2019

»

93…109

34

»

н/о

13.08.2019

»

н/у

35

Штамм «Ш-1»

2

03.06.2011

»

110

36

Щтамм №29089

2

18.10.2011

-

-

37

Штамм №33377

5

18.10.2011

-

-

Примечание: н/о – не определен, н/у – не указан

 

4.      Перечень изолятов/штаммов Streptococcus suis от свиней

List of isolates/strains of Streptococcus suis from pigs

№ п/п

Изолят/штамм

Дата выделения (получения)

Орган выделения

Возраст, сутки

1

Изолят

12.06.2013

Сустав

60

2

»

13.08.2013

»

50

3

»

15.03.2014

»

75

4

»

03.11.2014

»

40…50

5

»

10.02.2015

Селезенка

45

6

»

03.04.2015

»

150

7

»

20.05.2015

Сустав

50

8

»

21.05.2015

»

110

9

»

27.11.2015

Головной мозг

50

10

»

27.01.2016

Печень, селезенка

1…2

11

»

15.04.2016

Головной мозг

65

12

»

28.05.2016

Селезенка

20

13

»

18.06.2016

Головной мозг

55

14

»

05.08.2016

»                »

30…35

15

»

23.11.2016

»                »

63

16

»

18.02.2017

Селезенка

35

17

»

01.03.2017

Головной мозг

60

18

»

15.04.2017

Селезенка

53

19

»

03.05.2017

Сустав

21

20

»

06.05.2107

»

21

21

»

08.05.2107

Селезенка

35

22

»

09.07.2017

Печень, селезенка

42

23

»

02.08.2017

Селезенка

5

24

»

24.04.2017

Сустав

50

25

»

27.04.2017

Головной мозг

50…60

26

»

05.06.2018

»                »

10…15

27

»

03.06.2018

»                »

34…38

28

»

11.10.2018

»                »

30…35

29

»

14.01.2019

»                »

н/у

30

»

05.04.2019

»                »

н/у

31

»

19.04.2019

»                »

н/у

32

»

24.05.2019

»                »

н/у

33

»

06.08.2019

»                »

25…60

34

Штамм «КА-2»

02.03.2015

»                »

55

34

Штамм №43765

03.08.2016

-

-

Примечание: н/у ― не указано

 

 


Рис. 1. Чувствительность изолятов P. multocida, H. parasuis, A. pleuropneumoniae и S. suis к марбофлоксацину

Fig. 1. Susceptibility of P. multocida, H. parasuis, A. pleuropneumoniae and S. suis isolates to marbofloxacin

 

Все 29 исследуемых изолятов P. multocida, 26 изолятов H. parasuis и 34 изолята A. pleuropneumoniae проявили высокую чувствительность к марбофлоксацину. Из 33 исследуемых изолятов S. suis у 7 отмечена слабая чувствительность к препарату. Необходимо отметить, что из 96 протестированных изолятов возбудителей респираторных болезней свиней не выявлено ни одного резистентного.

 

5          Перечень изолятов Pasteurella multocida от КРС

List of isolates Pasteurella multocida from cattle

 

№ п/п

Изолят

Дата выделения (получения)

Орган выделения

Возраст, сутки

1

Изолят

10.06.2015

Легкие

н/у

2

»

02.07.2015

»

»

3

»

05.08.2015

»

»

4

»

03.09.2015

»

60

5

»

14.09.2015

»

н/у

6

»

14.10.2015

»

н/у

7

»

28.10.2015

»

30…40

8

»

24.02.2016

»

н/у

9

»

17.05.2016

»

»

10

»

27.06.2016

»

»

11

»

12.08.2016

»

»

12

»

16.09.2016

»

180

13

»

28.10.2016

»

120…180

14

»

13.02.2017

Носовые смывы

6…90

15

»

11.05.2017

Легкие

13…45

16

»

20.06.2017

»

н/у

17

»

06.07.2017

»

»

18

»

10.01.2018

Носовые смывы

30…120

19

»

12.02.2018

Легкие

н/у

20

»

15.02.2018

»

30

21

»

15.02.2018

Носовые смывы

150

22

»

17.08.2018

Легкие

н/у

23

»

30.08.2018

»

60…90

24

»

25.09.2018

Носовые смывы, легкие

90…120

25

»

24.10.2018

Носовые смывы, легкие

н/у

26

»

26.10.2018

Легкие

»

27

»

09.01.2019

»

»

28

»

09.01.2019

»

70…80

29

»

18.07.2019

»

н/у

30

»

18.07.2019

»

»

31

»

16.08.2019

»

»

Примечание: н/у – не указан.

 

5.      Перечень изолятов/штаммов Mannheimia haemolytica от КРС

List of isolates/strains Mannheimia haemolytica from cattlle

 

№ п/п

Изолят/штамм

Дата выделения (получения)

Орган выделения

Возраст, сутки

1

Изолят

10.11.2014

Легкие

15…30

2

»

19.11.2014

Носовые смывы

н/у

3

»

26.12.2014

Легкие

н/у

4

»

27.03.2015

»

»

5

»

02.06.2015

»

»

6

»

15.06.2015

»

»

7

»

02.07.2015

»

»

8

»

30.07.2015

»

»

9

»

03.09.2015

»

60

10

»

15.09.2015

»

90

11

»

14.09.2015

»

н/у

12

»

09.02.2016

»

60

13

»

29.03.2016

»

16…720

14

»

17.05.2016

»

н/у

15

»

27.06.2016

»

»

16

»

16.09.2016

»

180

17

»

29.09.2016

»

75

18

»

17.01.2017

»

730

19

»

13.02.2017

Носовые смывы

6…90

19

»

21.03.2017

Легкое

90

20

»

28.03.2017

»

365…730

21

»

06.07.2017

»

н/у

22

»

18.10.2017

»

н/у

23

»

10.01.2018

Носовые смывы

30…120

24

»

15.02.2018

Легкие

30

25

»

15.02.2018

Носовые смывы

150

26

»

03.05.2018

Легкие

н/у

27

»

10.08.2018

»

н/у

28

»

30.08.2018

»

60…90

29

»

22.11.2018

Носовые смывы

н/у

30

»

09.01.2019

Легкие

»

31

»

09.01.2019

»

»

32

»

18.01.2019

»

30…45

33

»

18.03.2019

»

н/у

34

»

18.07.2019

»

»

35

Штамм №29696

10.11.2017

-

-

Примечание: н/у – не указан.

 

7. Перечень изолятов Histophilus somni от КРС

 

№ п/п

Дата выделения (получения)

Орган выделения

Возраст, сутки

1

10.11.2014

Легкие

15…30

2

17.02.2015

»

н/у

3

28.04.2015

»

90

4

22.06.2015

»

60

5

15.09.2015

»

90

6

16.05.2016

Суставы конечностей

30

7

03.11.2016

Легкое

н/у

8

13.01.2018

Легкое, смывы из носа

» »

Примечание: н/у – не указан

 

8. Перечень изолятов ― возбудителей мастита КРС

List of isolates - of the causative agents of mastitis in cattle

№ п/п

Дата

Возбудитель

1

24.09.2015

Streptococcus agalactiae

Trueperella (Actinomyces) pyogenes

2

24.06.2015

Streptococcus agalactiae

Trueperella (Actinomyces) pyogenes

3

08.07.2015

Streptococcus agalactiae

4

30.07.2015

Staphylococcus aureus

5

21.08.2015

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

6

15.09.2015

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

7

23.10.2015

Streptococcus agalactiae

Escherichia coli

8

24.12.2015

Streptococcus agalactiae

Streptococcus uberis

Escherichia coli

9

26.01.2016

Streptococcus agalactiae

10

03.02.2016

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

11

19.02.2016

Streptococcus agalactiae

12

09.03.2016

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

13

06.04.2016

Staphylococcus aureus

Trueperella (Actinomyces) pyogenes

14

19.08.2016

Streptococcus agalactiae

15

22.08.2016

Streptococcus uberis

16

10.10.2016

Streptococcus agalactiae

17

20.10.2016

»

18

03.11.2016

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

19

01.11.2016

Trueperella (Actinomyces) pyogenes

20

03.03.2017

Streptococcus agalactiae

21

14.03.2017

»

22

27.03.2017

»

23

30.03.2017

Staphylococcus aureus

24

11.05.2017

Streptococcus agalactiae

Trueperella (Actinomyces) pyogenes

25

31.05.2017

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

26

26.07.2017

Streptococcus agalactiae

Pseudomonas aeruginosa

27

01.08.2017

Staphylococcus aureus

28

20.09.2017

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

29

21.09.2017

Streptococcus agalactiae

30

21.09.2017

Streptococcus agalactiae

Escherichia coli

31

14.12.2017

Streptococcus agalactiae

32

17.01.2018

»

33

18.01.2018

Streptococcus agalactiae

Trueperella (Actinomyces) pyogenes

Escherichia coli

34

23.01.2018

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus hyicus

35

26.01.2018

Staphylococcus hyicus

36

15.02.2018

Streptococcus uberis

37

19.02.2018

Streptococcus agalactiae

Trueperella (Actinomyces) pyogenes

38

11.04.2018

Streptococcus agalactiae

39

07.05.2018

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

40

31.05.2018

Escherichia coli

41

27.06.2018

Streptococcus agalactiae

42

08.08.2018

»

43

09.08.2018

Streptococcus uberis

44

31.08.2018

Streptococcus disgalactiae

45

31.07.2018

»

46

06.11.2018

Streptococcus agalactiae

47

15.11.2018

»

48

22.11.2018

»

49

18.12.2018

Streptococcus agalactiae

Escherichia coli

50

14.01.2019

Streptococcus agalactiae

51

14.01.2019

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

52

31.01.2019

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

53

19.02.2019

Trueperella (Actinomyces) pyogenes

54

26.02.2019

Streptococcus agalactiae

55

27.02.2019

»

56

28.02.2019

Streptococcus agalactiae

Streptococcus uberis

Staphylococcus haemolyticus

57

18.03.2019

Streptococcus disgalactiae

58

03.04.2019

Staphylococcus aureus

Escherichia coli

59

16.04.2019

Streptococcus disgalactiae

60

26.04.2019

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

61

15.05.2019

Streptococcus uberis

Staphylococcus aureus

62

12.07.2019

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

63

23.07.2019

Streptococcus uberis

64

14.08.2019

Staphylococcus aureus

65

28.08.2019

Streptococcus agalactiae

Staphylococcus aureus

66

28.08.2019

Streptococcus agalactiae

Streptococcus uberis

Staphylococcus aureus

67

29.08.2019

Staphylococcus aureus

68

05.09.2019

Streptococcus agalactiae

 


Рис. 2. Чувствительность изолятов Streptococcus agalactiae и Staphylococcus aureus к марбофлоксацину

Fig. 2. Susceptibility of Streptococcus agalactiae and Staphylococcus aureus isolates to marbofloxacin

 

Из 48 исследуемых изолятов Streptococcus agalactiae промежуточную чувствительность к марбофлоксацину проявили 6 (12,5 %), а резистентность ― 2 (4,1 %). Остальные 40 изолятов (83,4 %) показали высокую чувствительность к препарату. Из 22 изолятов Staphylococcus aureus промежуточную чувствительность к антибиотику проявили 4 (18,8 %), при этом резистентных не обнаружено.

Все 4 исследуемых изолята Streptococcus disgalactiae, 8 изолятов Streptococcus uberis, 8 изолятов Trueperella (Actinomyces) pyogenes, 2 изолята Staphylococcus hyicus, 1 изолят Staphylococcus haemolyticus и 1 изолят Pseudomonas aeruginosa проявили высокую чувствительность к марбофлоксацину. Из 7 исследуемых изолятов Escherichia coli ― два проявили промежуточную чувствительность и один проявил резистентность.

 

Выводы

1.                  Марбофлоксацин (в частности, препарат под торговой маркой Марфлоксин®) высокоэффективен в отношении возбудителей респираторных заболеваний свиней (Pasteurella multocida, Haemophilus parasuis, Actinobacillus pleuropneumoniae и Streptococcus suis).

2.                  Марбофлоксацин (в частности, препарат под торговой маркой Марфлоксин®) высокоэффективен в отношении возбудителей респираторных заболеваний КРС (Pasteurella multocida, Mannheimia haemolytica и Histophilus somni).

3.                  Марбофлоксацин (в частности, препарат под торговой маркой Марфлоксин®) эффективен в отношении возбудителей мастита КРС (Streptococcus agalactiae, Streptococcus disgalactiae, Streptococcus uberis, Staphylococcus aureus, Trueperella (Actinomyces) pyogenes, Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa).

 

Конфликт интересов

Компания ООО «КРКА ФАРМА» действует в интересах KRKA d. d. ― производителя лекарственного средства под торговой маркой Марфлоксин® (марбофлоксацин).

Список литературы

1. National Committee for Clinical Laboratory Standards, May 2004, M31-S1. Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals. Information Supplement. NCCLS, Wayne, PA.

Войти или Создать
* Забыли пароль?